培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠食管平滑肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
食管組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1555
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
大鼠食管平滑肌細胞分離自食管組織；食管可分為頸段、胸段和腹段，脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，肌層上1/3段為骨骼肌，下1/3為平滑肌，中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中，肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴格控制，食管還有括約肌，位于環(huán)狀軟骨水平的，稱為食管上括約??；位于食管下端，一部分在膈上，穿過膈孔，另一部分在膈下的高壓帶，稱為食管下括約肌。食管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠食管平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的大鼠食管平滑肌細胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人N-甲基-D-天冬氨酸受體(NMDAR)elisa分析檢測試劑盒
胰蛋白酶抑制劑混合物1ml
石蠟切片組織TNF BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
小鼠opiorphin elisa檢測試劑盒免費代測
DNA Ladder 1000 60T
人骨鈣素（BGP）elisa檢測試劑盒
pZERO＋目的基因
植物鈣調(diào)素(CaM)elisa檢測試劑盒
大鼠微纖絲相關(guān)糖蛋白3(MFAP3)elisa檢測試劑盒
轉(zhuǎn)錄因子SPIB蛋白抗體 SPIB
組胺受體H1抗體 HRH1
核仁蛋白10抗體 NOL10
核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體 RelB
NT5DC4蛋白抗體 NT5DC4
Pacific Blue標記小鼠CD45R單克隆抗體 mouse CD45R/Pacific Blue
上皮細胞粘附分子（CD326）抗體 EpCAM
神經(jīng)細胞穿透素2抗體 NPTX2
DNA聚合酶ζ抗體 REV3L/Polymerase DNA zeta
EFCAB3蛋白抗體 EFCAB3
磷酸化活化T細胞核因子5蛋白抗體 phospho-NFAT5 (Ser1197)
磷酸化神經(jīng)色氨酸羥化酶2抗體 phospho-TPH2 (Ser19)
補體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白4抗體 CTRP4
成纖維細胞生長因子16抗體 FGF16
小牛胸腺DNA抗體 calf thymus DNA
鋅指蛋白550抗體 ZNF550
植物源性飼料大豆基因檢測試劑盒
大鼠食管平滑肌細胞土壤全鐵測試盒
大鼠腦啡肽(ENK)elisa檢測試劑盒
FLJ25987; MGC8385; RPS27A; RPS 27A; UBA52; UBA 52; UBA80; UBA 80; UBB; UBC; UB; UBCEP1; UBCEP2; UBCEP 1; UBCEP 2; UBCEP-1; UBCEP-2; Ubiquitin; ubiquitin B; UBC_HUMAN; UBB_HUMAN; RS27A_HUMAN; HMG20; Ubiquitin carboxyl extension protein 80; Ubiquitin; Polyubiquitin-C; Polyubiquitin-B.
大鼠食管上皮細胞
小鼠嗅鞘細胞
HCC 38人乳腺導(dǎo)管癌細胞
Bel-7405人肝癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。