
產(chǎn)品名稱
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
支氣管組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1523
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由支氣管分出的各級分枝,由支氣管分出的支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長,走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)支氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區(qū)別就是,支氣管是以“C”型的支氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管平滑肌細(xì)胞主要功能:①支氣管平滑肌細(xì)胞能維持支氣管張力,保持支氣管形態(tài);②支氣管平滑肌特異的超微結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和調(diào)節(jié)機(jī)制是支氣管正常生理功能的基礎(chǔ);③支氣管平滑肌通過分泌細(xì)胞因子和趨化因子等促炎介質(zhì),發(fā)揮調(diào)節(jié)功能。支氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)elisa分析檢測試劑盒
大鼠26S蛋白酶體(26S PSM)elisa分析檢測試劑盒
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)elisa檢測試劑盒
貓甲狀旁腺(PTH)elisa分析檢測試劑盒
冰凍切片特恩布爾(TURNBULL-DAB)非血紅素鐵(二價)強(qiáng)化染色試劑盒
轉(zhuǎn)錄共激活因子TAZ抗體 Anti-TAZ
Rho家族GTP酶2抗體 Anti-RND2/Rho7
心臟特異性源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 Anti-Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1
鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 Anti-VAV1
線粒體核糖體蛋白S28抗體 MRPS28
小腦肽3抗體 CBLN3
巴爾得-別德爾綜合征相關(guān)蛋白5抗體 BBS1
半胱氨酸蛋白酶8抗體 caspase-8 subunit p18
CD2單克隆抗體 CD2
COREST蛋白抗體 COREST
磷酸化5-三磷酸肌醇受體1抗體 phospho-IP3 receptor (Ser1598)
磷酸化Smad2重組兔單克隆抗體 phospho-Smad2 (Ser255)
周期素依賴性激酶5抗體 CDK5
轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體 TCERG1
骨/軟骨蛋白多糖1重組兔單克隆抗體 Biglycan
含SH2結(jié)構(gòu)域蛋白D4A抗體 SH2D4A
MON1A蛋白抗體 MON1A
NDUFS6蛋白抗體 NDUFS6
溶質(zhì)載體家族39成員11抗體 SLC39A11
神經(jīng)保護(hù)肽HN抗體 Humanin
石蠟切片組織PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒
大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞植物elisa檢測試劑盒免費(fèi)代測
體液N-鏈接硫酸酯化糖胺多糖(N-sGAG)含量阿爾新藍(lán)(alcian blue)比色法定量檢測試劑盒
ATH 1; ATH1; ATOH 1; ATOH1; Atonal homolog 1; Atonal protein homolog 1; HATH 1; HATH1; Helix loop helix protein hATH 1; MATH 1; MATH1.
大鼠支氣管上皮細(xì)胞
小鼠輸尿管成纖維細(xì)胞
HS578T人乳腺癌細(xì)胞
C-33A人宮頸癌細(xì)胞