培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
雞小腸黏膜上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
小腸組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
上皮細胞樣
分類
雞原代細胞
貨號
A01X2307
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
雞小腸黏膜上皮細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因為食物經(jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能，其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力，促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障，持續(xù)暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強度。
方法簡介：
公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮細胞采用中性蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的雞小腸黏膜上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠骨粘連蛋白(ON)elisa分析檢測試劑盒
三碘甲狀腺原氨酸(T3)elisa檢測試劑盒
通用型痢疾志賀菌Shigella dysenteriae基因檢測試劑盒
/酵母細胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試劑盒
大鼠基因蛋白1a(REG-1a)elisa檢測試劑盒
大鼠組織因子前體(TF)elisa檢測試劑盒
RNA電泳樣品處理液
小鼠表皮調(diào)節(jié)素(EREG)elisa檢測試劑盒
大鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)elisa檢測試劑盒
鋅指蛋白230抗體 RNF141/ZNF230
鋅指蛋白622抗體 ZNF622
表皮生長因子樣蛋白1/Flamingo homolog 1抗體 CELSR3
叉頭蛋白P1抗體 FoxP1
DNAJB11蛋白抗體 DNAJB11
DZIP1L蛋白抗體 DZIP1L
磷酸化非受體型蛋白激酶抗體 Phospho-Syk (Tyr525 + Tyr526)
磷酸化磷酯酶Cβ3抗體 Phospho-PLC beta3 (Ser1105)
轉(zhuǎn)運蛋白DISP2抗體 DISP2
組蛋白連接作用蛋白抗體 SHPRH
核酸外切酶1抗體 Exonuclease 1
黑色素瘤相關(guān)抗原E2/肝細胞癌相關(guān)蛋白3抗體 MAGEE2/HCA3
OSGIN2蛋白抗體 OSGIN2
PE-Cy5標記人CD2單克隆抗體 human CD2/PE-Cy5
神經(jīng)緊張素抗體 Neurotensin
腎小球細胞粘附分子受體抗體 Nephrin
大鼠牛血清白蛋白(BSA)elisa檢測試劑盒
雞小腸黏膜上皮細胞鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)elisa分析檢測試劑盒
人蛋白激酶C(PKC)elisa檢測試劑盒免費代測
C22orf3; HS984G1A; Pituitary tumor apoptosis; PTAG; RHBD3_HUMAN; RHBDD3; Rhomboid domain containing 3; Rhomboid domain-containing protein 3.
人瘢痕疙瘩成纖維細胞
小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞
HUH-6人肝母細胞瘤細胞
Caco-2人直腸癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。