培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
肝臟
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
內(nèi)皮細(xì)胞樣
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2063
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞細(xì)胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也**消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內(nèi)皮細(xì)胞（SEC）是肝臟內(nèi)所占比例的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞，位于肝竇腔與肝細(xì)胞之間，具有物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)、吞噬、抗原提呈、耐受等功能。SEC由于擁有一般細(xì)胞所沒有的窗孔結(jié)構(gòu)、細(xì)胞間連結(jié)松散、內(nèi)皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，從而達(dá)到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時(shí)，肝竇內(nèi)皮細(xì)胞窗孔逐漸減少或消失，內(nèi)皮下基膜形成，產(chǎn)生類似于連續(xù)型的結(jié)構(gòu)，這一過程稱為肝竇化。它由多種因素引起，其過程極復(fù)雜，在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現(xiàn)，近年來受到廣泛關(guān)注。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶灌流消化、反復(fù)低速離心、密度梯度離心法，并通過內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31或CD14熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠抗凝血酶受體(ATR)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體(snRNP/Sm)elisa檢測(cè)試劑盒
α1微球蛋白α1- MG試劑盒 R1：40ml×1 R2：10ml×1 膠乳增強(qiáng)
植物聚甲基半乳糖醛酸酶（Polymethylgalacturonase；PMG）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠丙糖磷酸異構(gòu)酶1(TPI1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
組織氯乙?；D(zhuǎn)移酶（CAT）報(bào)告基因活性位素定量檢測(cè)試劑盒
人anti-Survivinelisa檢測(cè)試劑盒
葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體 SLC2A4RG
驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員24抗體 KIF24
G蛋白偶聯(lián)受體65抗體 GPR65
HER2受體單克隆抗體 HER2 receptor
有絲分裂細(xì)胞周期蛋白MPP9抗體 MPHOSPH9
載脂蛋白H抗體 APOH
紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白3抗體 SKA3
富含精氨酸/絲氨酸剪切因子17A抗體 SFRS17A
硒磷酸化物合成酶1抗體 SEPHS1
細(xì)胞角蛋白19單克隆抗體 Cytokeratin 19
TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子TAF1A抗體 TAF1A
T細(xì)胞分化蛋白MAL2抗體 MAL2
AF750標(biāo)記的CD163抗體 CD163, Alexa Fluor 750 conjugated
APC-Cy5.5標(biāo)記小鼠CD4單克隆抗體 Mouse CD4/APC-Cy5.5
精子頂體膜相關(guān)蛋白4抗體 SPACA4
賴脯胰島素抗體 Insulin Lispro
細(xì)胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒
兔肝竇內(nèi)皮細(xì)胞狗微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)elisa分析檢測(cè)試劑盒
200微升1厘米光徑塑料比色皿
ACT; ACTA3; ACTE; Actin gamma 2 smooth muscle enteric; Actin gamma enteric smooth muscle; Actin like protein; ACTL3; ACTSG; Alpha actin 3; Gamma 2 actin; Smooth muscle gamma actin; ACTH_HUMAN.
兔肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞
小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞
OS-RC-2人腎癌細(xì)胞
EMT6小鼠乳腺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。