產(chǎn)品名稱
兔肝外膽管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
膽管
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
分類
兔原代細(xì)胞
貨號
A01X2060
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔肝外膽管上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
兔肝外膽管上皮細(xì)胞分離自肝外膽管組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也**消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內(nèi)臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。臨床上常見的膽管病變?nèi)缒懙篱]鎖、先天性膽總管囊腫、原發(fā)性硬化性膽管炎等，都是以膽管上皮細(xì)胞為病變的靶位，引起膽管上皮的損傷。了解正常膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征和病變膽管上皮細(xì)胞的病理生理學(xué)特征對研究膽管病變的發(fā)病機制、診斷和具有重要意義。
方法簡介：
實驗室分離的兔肝外膽管上皮細(xì)胞采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中，通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的兔肝外膽管上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
DDOST/OST-48ELISAKit
巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)elisa分析檢測試劑盒
M-CSF ELISA Kit
人蛋白聚糖4(PRG4)elisa分析檢測試劑盒
HumanPRG4ELISAKit
小鼠表皮轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM3)elisa檢測試劑盒
大鼠Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)elisa檢測試劑盒
組織氯乙酰基轉(zhuǎn)移酶（CAT）報告基因活性位素薄層色譜（TLC）檢測試劑盒
人ATP酶（ATP）elisa檢測試劑盒
角蛋白相關(guān)蛋白KAP22.1抗體
KAP22.1
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白129抗體
CCDC129
大鼠甲狀腺球蛋白IgG抗體elisa分析檢測試劑盒
豬活化蛋白C(APC)elisa檢測試劑盒
人內(nèi)皮型一氧化氮合酶（eNOS）elisa檢測試劑盒
魔芋葡甘露聚糖比色法定量檢測試劑盒
Rh polypeptide 2抗體
RhD
KIAA1486蛋白抗體
KIAA1486
上調(diào)基因4抗體(N端) Anti-URG4
原鈣粘附蛋白8抗體 Anti-PCDH8
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶5抗體 Anti-PLK5
G蛋白偶聯(lián)受體14抗體 Anti-GPR14
ATTO550標(biāo)記的羊抗兔IgG H&L（進(jìn)口分裝）
兔肝外膽管上皮細(xì)胞Goat Anti-Rabbit IgG H&L / ATTO550
G氨基丁酸A型受體θ/GABAA Rθ抗體
ADP ribosyltransferase (NAD+; poly (ADP ribose) polymerase); ADP ribosyltransferase NAD+; ADPRT 1; ADPRT; ADPRT1; msPARP; NAD(+) ADP ribosyltransferase 1; pADPRT 1; pADPRT1; PARP 1; PARP; Poly (ADP ribose) polymerase 1; poly (ADP ribose) polymerase family, member 1; Poly adenosine diphosphate ADP ribose polymerase; Poly ADP ribose polymerase 1; Poly ADP ribose polymerase family member 1; Poly ADP ribose synthetase 1; poly(ADP ribose) synthetase; poly(ADP ribosyl)transferase; Poly[ADP ribose] synthetase 1; PPOL; sPARP 1; sPARP1; PARP1_HUMAN.
兔睪丸間質(zhì)細(xì)胞
小鼠海馬神經(jīng)干細(xì)胞
Panc 03.27人胰腺癌細(xì)胞
F-36P人白血病細(xì)胞