
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
兔睪丸間質細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
睪丸
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2127
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔睪丸間質細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介:
兔睪丸間質細胞分離自睪丸組織;睪丸間質細胞成群分布在曲精小管之間,胞體呈圓形,橢圓形或不規(guī)則形,胞體較大,直徑約20μm,胞質呈嗜酸性,細胞核呈圓形或卵圓形,常位于中央,染色較淡,有1-2個核仁線粒體多,呈管嵴狀,無分泌顆粒。從青春期開始,睪丸間質細胞受垂體前葉嗜堿性細胞分泌的間質細胞刺(黃體**素)的作用,能合成分泌雄性,可促進精子的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育,以及維持性征和性功能。
方法簡介:
實驗室分離的兔睪丸間質細胞采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的兔睪丸間質細胞經3β-HSD熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
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神經突觸相關蛋白SLITRK3抗體 Anti-SLITRK3
環(huán)指蛋白122抗體 Anti-RNF122
煙酰胺腺嘌呤二核苷酸酶1抗體 Anti-Nmnat1
Z DNA結合蛋白抗體 Anti-Z DNA binding protein
SPOP蛋白抗體
SPOP
MEMO1蛋白抗體
MEMO1
信號轉導銜接蛋白1抗體 Anti-STAM
外周苯二氮受體抗體 Anti-PBR/DBI/TSPO
顆粒蛋白前體抗體 Anti-PGRN/Granulin
腫瘤壞死因子α誘導蛋白1抗體 Anti-TNFAIP1
FITC標記大鼠IgG(型對照)
兔睪丸間質細胞Rat IgG / FITC
G蛋白偶聯受體112抗體
EndoG; Endonuclease G; Endonuclease G mitochondrial; EndonucleaseG; FLJ27463; ENDOG; NUCG_HUMAN; Endo G.
兔睪丸支持細胞
小鼠冠狀動脈平滑肌細胞
Panc 05.04人胰腺癌上皮細胞
F56人腺癌細胞系
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。