培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔破骨細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
骨髓
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
多核、巨細(xì)胞
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2146
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：多核、巨細(xì)胞
傳代特性：屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔破骨細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔破骨細(xì)胞分離自骨組織和骨髓；破骨細(xì)胞是骨組織中的多核巨細(xì)胞，位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認(rèn)為破骨細(xì)胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng)，其前體可能屬于造血干細(xì)胞的前單核細(xì)胞。破骨細(xì)胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對(duì)平衡，若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學(xué)者從破骨細(xì)胞著手研究破骨細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收，形成相互平衡的機(jī)制。但破骨細(xì)胞是一種終末分化細(xì)胞，屬于不增殖細(xì)胞群，不能增殖和傳代，只能進(jìn)行原代培養(yǎng)且存活時(shí)間較短。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔破骨細(xì)胞采用機(jī)械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔破骨細(xì)胞經(jīng)TRAP染色檢測(cè)，純度可達(dá)30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
體液HHV6-B（HUMAN HERPESVIRUS 6-B）病毒定性檢測(cè)試劑盒
冰凍切片少突膠質(zhì)細(xì)胞（OLIGODENDROCYTE）O4抗體組化染色試劑盒
人HIV-1 TAT互動(dòng)蛋白2(HTATIP2/TIP30)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠溶質(zhì)載體家族30成員5(SLC30A5)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素1α(IL-1α)elisa檢測(cè)試劑盒
人C－反應(yīng)蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液
人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)elisa分析檢測(cè)試劑盒
中心粒蛋白Nudel抗體 NUDEL
腫瘤抑制基因P53蛋白/野生型P53抗體 P53 protein(wt-p53)
干擾素α6抗體 Interferon alpha 6
谷氨酸半胱氨酸γ合成酶抗體 Ceramide glucosyltransferase
KPNA4蛋白抗體 KPNA4
MAPK/ERK激酶3重組兔單克隆抗體 MEKK3
熱休克蛋白10/groES抗體 HSP10
絨毛膜癌不表達(dá)蛋白1抗體 HOPX
BSPRY蛋白抗體 BSPRY
CD3E抗體 CD3E
李斯特菌溶胞素抗體 Listeriolysin
磷酸化CRK抗體 phospho-CRK (Ser41)
γ-谷氨?；h(huán)轉(zhuǎn)移酶抗體 GGCT
白介素1α前肽/IL-1α前肽抗體 IL-1 Alpha Propeptide
細(xì)胞色素P450 2A7抗體 CYP2A7
線粒體核糖體蛋白S34抗體 MRPS34
小鼠多巴胺D1受體(D1R)elisa分析檢測(cè)試劑盒
兔破骨細(xì)胞DAB顯色試劑盒黃
冰凍切片組織CASPASE-4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
mAChR M4; Muscarinic Acetylcholine Receptor M4; Cholinergic receptor muscarinic 4; Chrm 4; CHRM4; HM 4; HM4; M4; Muscarinic acetylcholine receptor M4; ACM4_HUMAN.
兔臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞
小鼠肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
SK-OV-3人卵巢癌細(xì)胞
HCC-1195人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。