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產品詳情
  • 產品名稱:兔乳腺成纖維細胞

  • 產品型號:
  • 產品**:撫生
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簡單介紹:
兔乳腺成纖維細胞公司正在出售的產品:NCI-H358人非小細胞肺癌細胞 1號染色體開放閱讀框159抗體 HDV IgM ELISA Kit 戊型肝炎病毒檢測試劑盒 轉錄中介因子Tif1γ抗體 人成細胞/遺傳性球形紅細胞增多癥;TK6
詳情介紹:

培養(yǎng)方法與步驟:


①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。

⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。




產品名稱

兔乳腺成纖維細胞

產品規(guī)格

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

組織來源

乳腺組織

生長特性

貼壁

細胞形態(tài)

成纖維細胞樣

分類

原代細胞

貨號

A01X2124

用途

僅供科研實驗

培養(yǎng)信息:


培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳

消化液 0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

細胞簡介:

兔乳腺成纖維細胞分離自乳腺組織;乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間,淺筋膜伸向乳腺組織內形成條索狀的小葉間隔,一端連于胸肌筋膜,另一端連于皮膚,將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數(shù)可以重復經(jīng)歷生長、功能分化和退化過程的器官之一。纖維結締組織伸入乳腺組織之間,形成許多間隔,這些纖維結締組織對起固定作用,而纖維結締組織是由成纖維細胞構成的。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的乳腺成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡介

公司實驗室分離的兔乳腺成纖維細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的兔乳腺成纖維細胞經(jīng)Vimentin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。

公司正在出售的產品:


小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)elisa分析檢測試劑盒

elisa分析檢測試劑盒

通用型精(arginine)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒

雙參數(shù)細胞周期G0期流式細胞分析試劑盒

X線膠片 100張

小鼠含血管性血友病因子A域蛋白3A(vWA3A)elisa檢測試劑盒

大鼠白介素35(IL-35)elisa檢測試劑盒

全組織酸性磷酸酶活性染色試劑盒

β膠原交聯(lián)(bCTx)elisa檢測試劑盒

熱休克蛋白70蛋白7抗體 HSPA7

溶血磷脂酸受體蛋白1/EDG2抗體 LPA1

IV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體 Collagen IV

KIAA1712蛋白抗體 KIAA1712

真核翻譯起始因子3亞基L/eIF3e蛋白抗體 IF3EI

植烷酰輔酶A羥化酶2抗體 HPCL2

鈣調蛋白OCM2抗體 OCM2

肝細胞粘附分子2抗體 HEPACAM2

細胞色素P450 4X1抗體 CYP4X1

細胞周期調控因子14A抗體 Cdc14A

ZDHHC24蛋白抗體 ZDHHC24

β-葡萄糖腦苷脂酶重組兔單克隆抗體 GBA

ASH1蛋白抗體 ASH1L

BEND4蛋白抗體 BEND4

跨膜蛋白SEMA3D抗體 Semaphorin 3D

磷酸化c-fos抗體 Phospho-c-Fos (Thr325)

大鼠皮質醇結合球蛋白(CBG)elisa檢測試劑盒

兔乳腺成纖維細胞ELISA試劑盒

人干擾素誘導跨膜蛋白1(IFITM1/CD225/IFI17)elisa分析檢測試劑盒

Catenin (cadherin associated protein) delta 2; Catenin delta 2; Catenin delta-2; CTND2_HUMAN; CTNND 2; CTNND2; Delta catenin; Delta-catenin; GT 24; GT24; Neural plakophilin related arm repeat protein; Neural plakophilin related armadillo repeat protein; Neural plakophilin-related ARM-repeat protein; Neurojungin; NPRAP

兔乳腺上皮細胞

小鼠大隱靜脈內皮細胞

SW1990人胰腺癌細胞

HCC-78人非小細胞肺癌細胞

原代細胞步驟


1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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