產(chǎn)品名稱
兔食管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
食管
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2045
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔食管上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
兔食管上皮細(xì)胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中，食管的上皮細(xì)胞增殖，由單層變?yōu)閺?fù)層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮，耐摩擦，有保護(hù)作用。在食管與胃賁門交界處，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復(fù)層扁平上皮細(xì)胞覆蓋，其頂端細(xì)胞膜和細(xì)胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障，防止食管內(nèi)容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細(xì)胞的基質(zhì)外側(cè)細(xì)胞膜和深層細(xì)胞的全部細(xì)胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動(dòng)的滲透壓之下。從組織學(xué)上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細(xì)胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達(dá)。食管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機(jī)制和食管癌變機(jī)制的非常好的體外模型。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔食管上皮細(xì)胞采用-膠原酶聯(lián)合消化法，并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔食管上皮細(xì)胞經(jīng)PCK熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人生長釋放肽（Ghrelin）elisa檢測(cè)試劑盒
LIP5抗體
LIP5
細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64抗體
CstF-64
小鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠促腎上腺皮質(zhì)釋放因子(CRF)elisa分析檢測(cè)試劑盒
血液一氧化氮（NO）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
人丙酮醛(MGO)elisa檢測(cè)試劑盒
NADPH氧化酶活化蛋白1抗體
NOXA2
通用轉(zhuǎn)錄因子3C多肽3/TFIIIC102抗體
GTF3C3/TFIIIC102
血栓素B2抗體(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因) Anti-TBX2/T-box2
多囊腎蛋白1抗體 Anti-Polycystin 1
蛋白磷酸酶1C抗體 Anti-PTPN6/SHP1
分泌性磷蛋白24抗體 Anti-SPP24/SPP2
磷酸化血小板源性生長因子受體-α抗體
Phospho-PDGFRA (Tyr1018)
嗅覺受體5D16抗體
OR5D16
DNA損傷修復(fù)酶ERCC3蛋白抗體 Anti-XPB/ERCC3
神經(jīng)降壓素受體1抗體 Anti-NTR1/Neurotensin Receptor 1
RFTN2蛋白抗體 Anti-RFTN2
STRN4蛋白抗體 Anti-Striatin 4/zinedin
大鼠α烯醇化酶(α-enolase)elisa分析檢測(cè)試劑盒
兔食管上皮細(xì)胞Rat α-enolase ELISA Kit
人核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
X-linked Inhibitor of Apoptosis Protein; RIAP-3; Baculoviral IAP repeat-containing protein 4; E3 ubiquitin-protein ligase XIAP; Inhibitor of apoptosis protein 3; X-linked IAP; IAP-like protein; HILP; BIRC4; HILP; XLP2; ILP1; Xiap; MIHA; hILP; IAP3; API3; XIAP; XIAP_HUMAN; ILP; hILP; IAP-3; hIAP-3; hIAP3; X-linked inhibitor of apoptosis protein.
兔視網(wǎng)膜前體細(xì)胞
兔椎體終板軟骨干細(xì)胞
TE-1人食管癌細(xì)胞
HCT-8人結(jié)直腸癌癌細(xì)胞