
產(chǎn)品名稱
兔心肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
心臟
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
梭形、多角形
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2018
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔心肌細胞體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介:
兔心肌細胞分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿酸等),使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀;細胞培養(yǎng)2h后開始貼壁,呈梭形;到12h左右,細胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;細胞分離培養(yǎng)48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細胞會出現(xiàn)搏動;心肌細胞為終末分化細胞,在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點,并具有自發(fā)性節(jié)律搏動,且心肌細胞的培養(yǎng)具有簡便、定量、重復(fù)性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點。利用培養(yǎng)的心肌細胞在探索非血液動力學(xué)因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié),研究心肌細胞的生物力學(xué)、凋亡、受體下調(diào)、缺血預(yù)處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其性進行評價以及從培養(yǎng)的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應(yīng)用前景,對于研究其生理功能、作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
實驗室分離的兔心肌細胞采用膠原酶-胰酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,并用化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔心肌細胞經(jīng)α-Sarcometric actin熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品:
pSilencer-NEO+SiRNA
鋅指蛋白801抗體
MAZ
脫氧鳥苷激酶抗體
DGUOK
小鼠神經(jīng)細胞粘附分子1(NCAM1)elisa分析檢測試劑盒
大鼠蛋白酶激活受體3(PAR3)elisa檢測試劑盒
細胞半胱-4(CASPASE-4)活性比色法定量檢測試劑盒
人成纖維細胞生長因子8(FGF8)elisa分析檢測試劑盒
原鈣粘蛋白γA6抗體
PCDHGA6
脫氧雙加氧酶抗體
HLRC1
促甲狀腺素受體抗體 Anti-TSHR
p19ARF抑癌基因抗體 Anti-p19ARF
前列腺素F2a/PGF2 α抗體 Anti-PGF2 alpha
細胞分化蛋白SEPT6抗體 Anti-SEPT6
APC標(biāo)記的兔抗狗IgG H&L
Rabbit Anti-Dog IgG H&L / APC
磷酸化系統(tǒng)性紅斑狼瘡先關(guān)蛋白TREX1抗體
phospho-ATRIP (Ser68+Ser72)
鋅指蛋白420抗體 Anti-ZNF420
SH2結(jié)構(gòu)域蛋白3A抗體 Anti-NSP1/SH2D3A
磷酸化受體結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2抗體 Anti-Phospho-RIP2 (Ser176)
肺表面活性蛋白A抗體 Anti-SP-A
大鼠ATP1B4蛋白(ATP1B4)elisa分析檢測試劑盒
兔心肌細胞ATP1B4 ELISA kit
人肝X受體β(LXRβ)elisa分析檢測試劑盒
LRR and PYD domains-containing protein 1; CARD 7; CARD7; Caspase recruitment domain protein 7; Caspase recruitment domain-containing protein 7; CLR17.1; Death effector filament forming Ced 4 like apoptosis protein; Death effector filament-forming ced-4-like apoptosis protein; DEFCAP; DEFCAP L/S; NAC alpha/beta/gamma/delta; NAC; NACHT; NACHT leucine rich repeat and PYD containing 1; NACHT leucine rich repeat and PYD pyrin domain containing 1; NACHT leucine rich repeat and pyrin domain containing 1; NACHT LRR and PYD containing protein 1; NALP 1; NALP1; NALP1_HUMAN; NLR family pyrin domain containing 1; NLRP 1; NLRP1; NLRP1 protein; Nucleotide binding domain and caspase recruitment domain; Nucleotide binding oligomerization domain leucine rich repeat and pyrin domain containing 1; Nucleotide-binding domain and caspase recruitment domain; PP 1044; PP1044.
兔心臟微血管內(nèi)皮細胞
兔胰腺腺泡上皮細胞
ZR-75-1人乳腺癌細胞
HET-1A人食管上皮細胞