培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
腸組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
內(nèi)皮細(xì)胞樣
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1825
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中長(zhǎng)的一段，也是功能重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的，大腸主要濃縮食物殘?jiān)纬杉S便，再通過(guò)直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。微血管是極細(xì)微的血管，管徑平均為6-9μm，連于動(dòng)、靜脈之間，互相連接成網(wǎng)狀。微血管壁薄，管徑較小，血流很慢，通透性大。其功能是利于血液與組織之間進(jìn)行物質(zhì)交換。其管壁主要由一層內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成，在內(nèi)皮外面有一薄層結(jié)締組織。另外還常可見到一種扁而有突起的細(xì)胞貼在微血管的管壁外面，稱為周細(xì)胞。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品：
通用細(xì)胞HRP酶聯(lián)檢測(cè)封閉溶液
植物組織線粒體形態(tài)/活性熒光染色試劑盒
大鼠血管緊張素Ⅱ受體1(AT1R)elisa檢測(cè)試劑盒
大麥β-活性PNPG5酶偶聯(lián)比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠C-肽(C-Peptide)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞肌酸激酶工酶肌肉型（CK-MM）活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒
人肝素結(jié)合EGF樣生長(zhǎng)因子(HBEGF)elisa檢測(cè)試劑盒
鋅指蛋白532抗體 ZNF532
鋅指蛋白833抗體 ZNF833
層粘連蛋白5抗體 Laminin 5
雌酮-3-葡糖苷酸抗體 Estrone-3-Glucuronide
DPH4蛋白抗體 DPH4
ELAVL1單克隆抗體 ELAVL1
磷酸化激酶B抗體 phospho-TrkB (Tyr515)
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體 Phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222)
組蛋白H3.3C抗體 Histone H3.3C
11號(hào)染色體開放閱讀框77抗體 C11ORF77
黑色素瘤抗原樣基因2抗體 MAGEL2
環(huán)指蛋白150抗體 RNF150
PDK1重組兔單克隆抗體 PDPK1
PerCP-Cy5.5標(biāo)記人CD9單克隆抗體 human
CD9/PerCP-Cy5.5
神經(jīng)細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子DAT1抗體
水通道蛋白4抗體 Aquaporin 4
人降脂素(Adipsin)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞組織胰腺脂酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠血小板反應(yīng)蛋白2(THBS2)elisa檢測(cè)試劑盒
MYCD; MYCD_HUMAN;
Myocardin; Myocd.
小鼠成骨細(xì)胞
兔心肌干細(xì)胞
C2C12小鼠成肌細(xì)胞
HO-8910PM人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。