產(chǎn)品名稱
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
冠狀動(dòng)脈
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
內(nèi)皮細(xì)胞樣
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1779
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自冠狀動(dòng)脈組織；冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈，起于主動(dòng)脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型：右優(yōu)勢(shì)型、均衡型、左優(yōu)勢(shì)型。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干，發(fā)自左主動(dòng)脈竇，經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過(guò)心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合。冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層扁平分布，是一薄層的專門上皮細(xì)胞，它形成冠狀動(dòng)脈的內(nèi)壁，是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁（單層鱗狀上皮）的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng)，由心臟直至小的微血管。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶短暫消化后組織貼塊、結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
sTMELISAKit
大鼠GTP酶 KRas elisa分析檢測(cè)試劑盒
Rat GTPase KRas ELISA Kit
人谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶2抗體(IgA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanTransglutaminase2antibodyIgAELISAkit
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子4(SDF4)elisa檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞PYK2激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
人結(jié)合珠蛋白（HPT）elisa檢測(cè)試劑盒
組蛋白轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白3抗體
HIR3
小腸鈉通道蛋白5抗體
ACCN5
大鼠雌二醇(E2)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠血管生成素4(ANG-4)elisa檢測(cè)試劑盒
人白介素2受體(IL2R)elisa分析檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞磷脂酶C（Phospholipase C）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
OXCT2蛋白抗體
OXCT2
甲型肝炎病毒聚蛋白VP1抗體
Hepatitis A virus polyprotein VP1
轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體2抗體（TGF-βRⅡ，TGFβRⅡ） Anti-TGF beta R2/TGFBR2
PEG3蛋白抗體 Anti-PEG3
組蛋白賴氨酸去甲基化酶PHF8抗體 Anti-PHF8
5-羥色胺受體5A抗體 Anti-5HT5A receptor/SR-5A
PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗人IgG H&L
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Mouse Anti-Human IgG H&L / PE-Cy5
F-box蛋白家族FBXO7抗體
CN028_HUMAN; Dopamine receptor interacting protein 1; Dopamine receptor-interacting protein 1; DRIP 1; DRIP1; Uncharacterized protein C14orf28; C14orf28.
小鼠冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
兔視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞
LA795小鼠肺腺癌細(xì)胞
HT-22小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞