培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
小鼠冠狀動脈平滑肌細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
冠狀動脈
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
成纖維細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1780
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
小鼠冠狀動脈平滑肌細胞分離自冠狀動脈組織；冠狀動脈是供給心臟血液的動脈，起于主動脈根部，分左右兩支，行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則，將冠狀動脈的分布分為三型：右優(yōu)勢型、均衡型、左優(yōu)勢型。左右冠狀動脈是升主動脈的對分支。左冠狀動脈為一短干，發(fā)自左主動脈竇，經肺動脈起始部和左心耳之間，沿冠狀溝向左前方行后，立即分為前室間支和旋支。前室間支沿前室間溝下行，旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分，細胞膜上分布著多種離子通道，如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道；它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化、超極化，調節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能，此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖、炎癥及凋亡等。因此，原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細胞，對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠冠狀動脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠冠狀動脈平滑肌細胞經α-SMA熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品：
大鼠核受體亞家族1D組成員2(NR1D2)elisa檢測試劑盒
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 500T
小鼠過敏/補體片斷4a(C4a)elisa檢測試劑盒
微量瓊脂糖凝膠DNA回收試劑盒 50次
石蠟切片結締組織（CONNECTIVE TISSUE）摩羅利 （mallory）染色試劑盒
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細胞PDGFRβ激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
人膠質細胞系來源的神經營養(yǎng)因子(GDNF)elisa分析檢測試劑盒
腺衍生血管內皮生長因子抗體 Prokineticin 1
凝溶膠蛋白抗體 Gelsolin
FOXJ2蛋白抗體 FOXJ2
GTP結合蛋白SAR1B抗體 SAR1B
胰島素促進因子重組兔單克隆抗體 PDX1
乙?；M蛋白H3抗體 Histone H3 (acetyl K9)
多巴胺受體D1重組兔單克隆抗體 DRD1
法尼基轉移酶β-亞單位抗體 FNTB
突觸核膜蛋白2抗體 Nesprin 2
微管蛋白β輔助因子D抗體 Beta tubulin cofactor D
RSPH3蛋白抗體 RSPH3
SH3BGRL2蛋白抗體 SH3BGRL2
8號染色體開放閱讀框74抗體 C8orf74
AF594標記的單體櫻桃紅熒光蛋白標簽抗體 mCherry, Alexa Fluor 594 conjugated
鉀離子通道蛋白家族KCNQ1抗體 KCNQ1
卷曲螺旋結構域蛋白114抗體 CCDC114
冰凍切片組織P35蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
小鼠冠狀動脈平滑肌細胞大鼠整合素α2(ITGA2)elisa檢測試劑盒
通用型副傷A（Salmonella Paratyphi A）定性基因檢測試劑盒
59 kDa; A 116A10.1; Amyloid beta precursor protein binding protein 1 59kD; Amyloid beta precursor protein binding protein 1 59kDa; Amyloid beta precursor protein binding protein 1; Amyloid beta precursor protein-binding protein 1; Amyloid protein binding protein 1; Amyloid protein-binding protein 1; APP BP1; APP-BP1; APPBP 1; HPP 1; HPP1; NAE 1; NAE1; NEDD8 activating enzyme E1 regulatory subunit; NEDD8 activating enzyme E1 subunit 1; NEDD8 activating enzyme E1 subunit; NEDD8-activating enzyme E1 regulatory subunit; Proto oncogene protein 1; Proto-oncogene protein 1; Protooncogene protein 1; ula 1; ULA1_HUMAN.
小鼠海馬神經元細胞
兔視網膜微血管內皮細胞
LLC小鼠肺癌細胞
HT-29 (HT29)人結腸癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。