
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
小鼠卵巢顆粒細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
卵巢組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
上皮細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1870
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
小鼠卵巢顆粒細胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產生卵以及類固醇。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發(fā)育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產卵期有關。大多數脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于兩側的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成;髓質位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、管和神經。卵巢顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體分泌等卵巢功能活動。卵巢顆粒細胞是卵泡內的大細胞群,也是主要的功能細胞,卵泡發(fā)育的顯著標志之一就是顆粒細胞迅速生長及增殖,而成年動物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細胞凋亡引起,尤其在卵泡發(fā)育后期,此外,顆粒細胞還與卵泡膜細胞共同完成卵巢的合成,維持著有利于卵母細胞生長和成熟的微環(huán)境。細胞形狀呈圓形或橢圓形。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠卵巢顆粒細胞采用先機械分離,而后膠原酶消化,后差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠卵巢顆粒細胞經FSHR熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產品:
IgG4ELISAKit
大鼠TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)elisa分析檢測試劑盒
TIEG1 ELISA Kit
人胱抑素A(CSTA/STF1/STFA)elisa分析檢測試劑盒
CSTA/STF1/STFAELISAkit
小鼠新生甲狀腺素(NN-T4)elisa檢測試劑盒
大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)elisa檢測試劑盒
組織三磷酸肌醇(IP3)含量化學熒光定量檢測試劑盒
山羊白介素10(IL-10)elisa檢測試劑盒
孕/孕酮(PROG)elisa分析檢測試劑盒
PROG ELISA kit
人白介素4(IL-4)elisa分析檢測試劑盒
HumanIL-4ELISAKIT
WNV(WEST NILE)病毒標準曲線定量PCR擴增檢測試劑盒
兔總膽固醇elisa檢測試劑盒
大鼠前列腺特異性抗原(PSA)elisa檢測試劑盒
ETHIDIME BROMIDE簡易細胞核形態(tài)染色試劑盒
嘌呤核苷磷酸化酶抗體
Nucleoside phosphorylase
9號染色體開放閱讀框7抗體
C9orf7
谷氨酰胺轉胺酶3抗體 Anti-TGM3
平足蛋白抗體(管內皮細胞蛋白) Anti-Podoplanin Protein/gp36
果糖-2,6-二磷酸酶1抗體 Anti-PFKFB1
缺氧誘導基因95抗體 Anti-SESN2/Hi95
辣根過氧化物酶標記的小鼠抗兔IgM
小鼠卵巢顆粒細胞Mouse Anti-Rabbit IgM / HRP
溶質載體家族蛋白12成員A1抗體
FHA domain-containing protein SNIP1; FLJ12553; Smad nuclear interacting protein (Smad nuclear interacting); Smad nuclear interacting protein; Smad nuclear-interacting protein 1; SNIP1 (Smad nuclear interacting protein); SNIP1; SNIP1_HUMAN; Splicing factor arginine/serine rich 4 (Pre mRNA splicing factor SRP75).
小鼠卵泡膜細胞
兔腎動脈內皮細胞
NIT-1小鼠胰島素瘤β細胞
HUV-EC-C [HUVEC](人臍靜脈血管內皮細胞)
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。