產(chǎn)品名稱
小鼠腎小管上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腎組織
生長特性
貼壁
細胞形態(tài)
上皮細胞樣
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1833
用途
僅供科研實驗
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞簡介：
小鼠腎小管上皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是**尿液，借以體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有功能，**腎素、促紅細胞**素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分的降解場所和腎外的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結構、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分；近端小管可分為直部和曲部，曲部也稱為近曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)，于腎小體附近高度蟠曲；遠端小管曲部也稱為遠曲小管，位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞，腎小管上皮細胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟的一項重要技術，目前該細胞分離方法有酶分離法、化學分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能：①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非營養(yǎng)物質(zhì)進入終尿；③細胞能分泌炎癥介質(zhì)如細胞因子和趨化因子，通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原，這說明腎小管上皮細胞參與腎損傷的發(fā)生。隨著對腎間質(zhì)纖維化機制研究的日漸加深，腎小管上皮細胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視。因此，提供良好的腎小管上皮細胞模型，在腎小管間質(zhì)的發(fā)病機制和篩選的研究中是非常重要的。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠腎小管上皮細胞采用先機械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化，結合上皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠腎小管上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
正鐵細胞色素C-氧化還原酶 20管/10樣
人白介素35(IL-35)elisa分析檢測試劑盒
組織磷酸二酯酶（PDE）總活性熒光定量檢測試劑盒
小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)elisa分析檢測試劑盒
大鼠降鈣素(CT)elisa檢測試劑盒
植物氧化應激活性氧（ROS）比色法定量檢測試劑盒（羥自由基）
大鼠肉毒堿棕櫚酰基轉移酶1A(CPT1A)elisa檢測試劑盒
體液KSHV（KAPOSI SARCOMA-ASSOCIATED HERPESVIRUS）病毒定性檢測試劑盒
豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)elisa分析檢測試劑盒
磷酸化孕受體抗體 Phospho-Progesterone Receptor (Ser190)
磷脂酰肌醇3磷酸激酶5Ⅲ型抗體 PIP5K3
EHBP1L1蛋白抗體 EHBP1L1
FAM116A蛋白抗體 FAM116A
鋅指蛋白772抗體 ZNF772
信號通路Wnt2B抗體 WNT2B
成纖維細胞生長因子樣蛋白1抗體 KGFLP1
單核細胞趨化蛋白4抗體 CCL13
水解酶結構域蛋白13抗體 ABHD13
絲氨酸蛋白酶抑制劑SPINK9抗體 SPINK9
PE-Cy7標記小鼠CD62L單克隆抗體 mouse CD62L/PE-Cy7
PE標記人CD90單克隆抗體 human CD90/PE
組織相容性抗原DOB抗體 HLA DOB
1號染色體開放閱讀框105抗體 C1orf105
環(huán)腺苷酸應答元件結合蛋白5抗體 CREB5
肌原調(diào)節(jié)抑制蛋白抗體 MDFIC
大鼠白介素17(IL17)elisa檢測試劑盒
小鼠腎小管上皮細胞小鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)elisa分析檢測試劑盒
甘油三酯（TG）含量測試盒
RAB 6C; Rab6 like protein WTH3; Rab6-like protein WTH3; RAB6C; RAB6C member RAS oncogene family; RAB6C_HUMAN; Ras related protein Rab 6C; Ras-related protein Rab-6C; WTH3.
小鼠腎小球內(nèi)皮細胞
兔胚胎成纖維細胞
AR42J大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細胞
K562/LUC (STR)人慢性髓系白血病細胞帶熒光素酶