產(chǎn)品名稱
小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
胃組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
分類(lèi)
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1802
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞分離自胃黏膜組織；胃黏膜柔軟，活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞，充盈時(shí)變平坦。幽門(mén)處的黏膜形成環(huán)形皺襞，突向腔內(nèi)稱幽門(mén)瓣。胃黏膜可分為三層，即上皮層（單層柱狀上皮）、固有層（由結(jié)締組織構(gòu)成、含有大量的胃腺）和黏膜肌層（為薄層平滑肌、排列成內(nèi)環(huán)外縱）。胃黏膜上皮細(xì)胞源自胃黏膜的上皮層，細(xì)胞為單層柱狀上皮，排列整齊，能分泌黏液覆蓋于胃黏膜的表面，防止胃酸和胃蛋白酶對(duì)胃黏膜的損害。體外培養(yǎng)胃黏膜上皮細(xì)胞為研究細(xì)胞功能及致病因子、、對(duì)細(xì)胞的損傷、保護(hù)和功能調(diào)控提供了簡(jiǎn)單而的模型。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠乙酰膽堿酯酶（AchE）elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠Ⅵ型膠原(Col Ⅵ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
活體細(xì)胞脘蛋白去糖基化試劑盒
人11-脫氧皮質(zhì)醇elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
動(dòng)物小腸組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒
大鼠死亡誘導(dǎo)終結(jié)因子1(DIDO1)elisa檢測(cè)試劑盒
酵母菌完全補(bǔ)充混合（CSM－HOLLENBERG）培養(yǎng)基
巴氏染色試劑盒Papanicolaou EA65400ml
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白P48抗體 RBBP4
絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白4抗體 SRRM4
PCQAP蛋白抗體 PCQAP
PerCP-Cy5.5標(biāo)記人CD64單克隆抗體 human CD64/PerCP-Cy5.5
組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移酶重組兔單克隆抗體 SUV39H1
11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框67抗體 C11ORF67
黑皮質(zhì)素-1受體抗體 MC1R
環(huán)指蛋白146抗體 RNF146
鋅指蛋白776抗體 ZNF776
信號(hào)通路Wnt4單克隆抗體 WNT4
程序性死亡配體2（CD273）抗體 PDCD1LG2
單加氧酶X抗體 MOXD1
EHD3蛋白抗體 EHD3
FAM119A蛋白抗體 FAM119A
磷酸化受體激酶抗體 phospho-TYRO3 (Tyr681)
磷酸乙醇胺轉(zhuǎn)移酶2抗體 PCYT2
彩虹預(yù)染蛋白Marker10-250KD 250ul
小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞細(xì)胞樣品氧化酶表達(dá)熒光定量檢測(cè)試劑盒
半纖維素含量測(cè)試盒
Caspase-2 subunit p18; Apoptosis related cysteine peptidase; CASP 2; Casp 2L Pro; CASP2; Caspase 2 apoptosis related cysteine protease; Caspase2; Developmentally down regulated 2; ICH 1; ICH 1 protease; ICH 1L; ICH 1L/1S; ICH1; ICH1 protease; ICH1L; ICH1L/1S; NEDD 2; NEDD2; NEDD2 apoptosis regulatory gene; Neural precursor cell expressed; Neural precursor cell expressed developmentally down regulated 2.
小鼠胃平滑肌細(xì)胞
兔腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
L6大鼠成肌細(xì)胞
KM12人結(jié)腸癌細(xì)胞