
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠胃平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
胃組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
成纖維細(xì)胞樣
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1803
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
小鼠胃平滑肌細(xì)胞分離自胃組織;胃柔軟,活體呈橘紅色。胃空虛時(shí)形成許多皺襞,充盈時(shí)變平坦。胃壁由粘膜、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構(gòu)成。粘膜上皮為柱狀上皮。上皮向粘膜深部下陷構(gòu)成大量腺體(胃底腺、賁門腺、幽門腺),它們的分泌物混合形成胃液,對食物進(jìn)行化學(xué)性消化。粘膜在幽門處由于覆蓋幽門括約肌的表面而形成環(huán)狀的皺襞叫幽門瓣。胃肌膜由三層平滑肌構(gòu)成,外層縱形,中層環(huán)形,內(nèi)層斜行,其中環(huán)形肌,在幽門處特別增厚形成幽門括約肌。胃平滑肌細(xì)胞源自胃的平滑肌層,細(xì)胞通過緊密連接,進(jìn)行同步性運(yùn)動(dòng),完成肌肉的舒縮活動(dòng),以推動(dòng)食物前進(jìn),完成對食物的機(jī)械性消化,并促進(jìn)化學(xué)性消化和吸收。胃平滑肌具有肌組織的共同特性,如興奮、自律性、傳導(dǎo)性和收縮性,在離體后,置于適宜的環(huán)境內(nèi),仍能進(jìn)行良好的節(jié)律性運(yùn)動(dòng),但其收縮很緩慢,節(jié)律性遠(yuǎn)不如心肌規(guī)則。胃平滑肌對電刺激較不敏感,但對于牽張、溫度和化學(xué)刺激則特別敏感,輕微的刺激??梢饛?qiáng)烈的收縮。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環(huán)境分不開的,胃內(nèi)容物對平滑肌的牽張、溫度和化學(xué)刺激是引起內(nèi)容物推進(jìn)或排空的自然刺激因素。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胃平滑肌細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胃平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔甲狀旁腺(PTH)elisa檢測試劑盒
人白介素17A(IL-17A)elisa檢測試劑盒
血液尿激酶(UROKINASE)活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠牛小腸堿性磷酸酶(CIAP)elisa檢測試劑盒
大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)elisa檢測試劑盒
魚熱休克蛋白40(HSP-40)elisa分析檢測試劑盒
大鼠松弛肽/松弛素1(RLN1)elisa檢測試劑盒
10倍酵母菌SD-TRP/URA培養(yǎng)基
支原體去除試劑10ml
源三聚體鋅指蛋白ZHX3抗體 ZHX3
唾液酸結(jié)合性球蛋白樣凝集素12抗體 SIGLECL1
RNA結(jié)合蛋白35B抗體 RBM35B/ESRP2
Schlafen家族14抗體 SLFN14
6號染色體開放閱讀框97抗體 C6orf97
ADAMTS13重組兔單克隆抗體 ADAMTS13
甲狀腺過氧化物酶抗體 Thyroid peroxidase
堿性磷酸酶(類胎盤型)抗體 ALPPL2
胰羧肽酶A6抗體 CPA6
抑癌蛋白DKK1抗體 DKK1
多腺苷二磷酸多聚酶抗體 [KO驗(yàn)證抗體] PARP1
泛素羧基末端水解酶5單克隆抗體 USP5
GALNT3蛋白抗體 GALNT3
G蛋白結(jié)合蛋白RAB相互作用蛋白4抗體 RAB11FIP4
莫洛尼白血病病毒蛋白10抗體 Mov10
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)退化蛋白3抗體 DERL3
大鼠β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)elisa檢測試劑盒
小鼠胃平滑肌細(xì)胞小鼠骨成型蛋白7(BMP-7)elisa分析檢測試劑盒
人β防御素(β-Defensin)elisa檢測試劑盒
C type lectin domain family 14, member A; C14orf27; CEG1; ClECT and EGF like domain containing protein; EGFR5; EGFR-5; EGFR 5; Epidermal growth factor receptor 5; CLC14_HUMAN.
小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞
兔毛囊角質(zhì)細(xì)胞
NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞
KMBC-2人膀胱癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。