產(chǎn)品名稱
小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
小腸組織
生長特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
上皮細(xì)胞樣
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1807
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞簡介：
小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi)，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的，因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動的機(jī)械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切；構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和細(xì)胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似，絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動功能，其中以吸收和分泌功能為主。小腸腔面的環(huán)行皺襞從幽門附近開始出現(xiàn)，在十二指腸末段和空腸頭段極發(fā)達(dá)，向下逐漸減少和變矮，至腸中段以下基本消失。粘膜表面還有許多細(xì)小的腸絨毛，是由上皮和固有層向腸腔突起而成，形狀不一，以十二指腸和空腸頭段。絨毛于十二指腸呈葉狀，于空腸呈指狀，于回腸則細(xì)而短。環(huán)行皺襞和絨毛使小腸表面積擴(kuò)大20-30倍，絨毛根部的上皮下隱至固有層形成管狀的小腸腺，又稱腸隱窩，故小腸腺與絨毛的上皮是連續(xù)的，小腸腺直接開口于腸腔。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過上皮細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠（NE）elisa檢測試劑盒
小鼠白介素1α（IL－1α）elisa檢測試劑盒
非位素AP化學(xué)發(fā)光法RNA北方雜交試劑盒
P38蛋白共沉淀分析試劑盒
NADPH氧化酶活性測試盒 20T 比色法
血清高密度脂蛋白（HDL-C）測試盒
大鼠糖原磷酸化酶B(PYGB)elisa檢測試劑盒
植物葉片活性葉綠體分離試劑盒
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅳ/細(xì)胞色素C氧化酶測試盒
G蛋白偶聯(lián)受體147抗體 NPFF1 Receptor
G蛋白轉(zhuǎn)錄因子α2/Gα t2抗體 GNAT2
內(nèi)著絲粒蛋白抗體 INCENP
胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白1抗體 1-Oct
芳香化酶/細(xì)胞色素P450/雌合成酶抗體 Aromatase
附睪分泌蛋白4重組兔單克隆抗體 HE4
胰島素樣肽5抗體 DILP5
異質(zhì)核核糖核蛋白L樣蛋白抗體 hnRNPLL
STOX1蛋白抗體 STOX1
TRIM62蛋白抗體 TRIM62
突觸小泡蛋白P38抗體 Synaptophysin
微絲相關(guān)蛋白3抗體 MFAP3
緊密連接蛋白抗體 Occludin
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白147抗體 CCDC147
9號染色體開放閱讀框66抗體 C9orf66
AF680標(biāo)記的晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體 RAGE, Alexa Fluor 680 conjugated
大鼠氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)elisa檢測試劑盒
小鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞/酵母細(xì)胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測定試劑盒
山羊骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析檢測試劑盒
SNCA; SYUA_HUMAN; Alpha synuclein; Alpha-synuclein, isoform NACP140; alpha SYN; MGC105443; MGC110988; MGC127560; MGC64356; NACP; Non A beta component of AD amyloid; Non A4 component of amyloid precursor; Non-A-beta component of alzheimers disease amyloid , precursor of; Non-A beta component of AD amyloid; Non-A4 component of amyloid precursor; PARK 1; PARK 4; PARK1; PARK4; Parkinson disease (autosomal dominant, Lewy body) 4; Parkinson disease familial 1; Syn; Snca synuclein, alpha (non A4 component of amyloid precursor); Synuclein alpha; Synuclein, alpha (non A4 component of amyloid precursor); Synuclein-α; Synuclein α. α-Synuclein; α Synuclein; Synuclein α.
小鼠心肌成纖維細(xì)胞
兔脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞
PC12低分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 低分化
KMS-28BM人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞