
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開(kāi)腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好,可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
小鼠嗅鞘細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
嗅球組織
生長(zhǎng)特性
貼壁
細(xì)胞形態(tài)
神經(jīng)元細(xì)胞樣
分類(lèi)
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1966
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠嗅鞘細(xì)胞分離自嗅球組織;嗅鞘細(xì)胞(OECs)是在功能上介于施旺細(xì)胞和少突膠質(zhì)細(xì)胞之間的一種特殊的膠質(zhì)細(xì)胞,具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)、抑制膠質(zhì)增生、瘢痕形成、成鞘作用等;為軸突生長(zhǎng)提供了適宜的微環(huán)境及較強(qiáng)的遷移的特性,使其成為促進(jìn)神經(jīng)再生的理想候選細(xì)胞之一。嗅鞘細(xì)胞是目前所發(fā)現(xiàn)的極少數(shù)的神經(jīng)系統(tǒng)可以再生細(xì)胞之一,其特點(diǎn)為終身具有神經(jīng)再生功能,還能夠釋放多種神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、神經(jīng)粘附分子。被認(rèn)為是髓鞘化能力強(qiáng)的膠質(zhì)細(xì)胞,逐漸用于脊髓損傷。嗅鞘細(xì)胞與膠質(zhì)細(xì)胞、雪旺細(xì)胞在表現(xiàn)型上有共同點(diǎn),它們都能促進(jìn)軸突的再生,主要區(qū)別在于嗅鞘細(xì)胞不但存在于神經(jīng)系統(tǒng),也存在于外周神經(jīng)中。嗅鞘細(xì)胞被認(rèn)為是一種可塑性很高的細(xì)胞,它可表現(xiàn)出多種細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞表面標(biāo)志,在嗅系統(tǒng)發(fā)育過(guò)程中,嗅鞘細(xì)胞根據(jù)其在組織定位的不同而有不同的抗原表型,其中P75NTR、GFAP、和O4可標(biāo)記大部分在體嗅鞘細(xì)胞,然而在嗅球外神經(jīng)層O4陽(yáng)性嗅鞘細(xì)胞仍然可以在P75NTR陽(yáng)性細(xì)胞層內(nèi)分化成E-NCAM陽(yáng)性的細(xì)胞層,還有一定比率的嗅鞘細(xì)胞P75NTR陰性而NY和S100表型為陽(yáng)性。嗅黏膜中的神經(jīng)元是生后才生長(zhǎng)并在成年時(shí)繼續(xù)分化的神經(jīng)元,壽命為4-12周,隨著新細(xì)胞的生長(zhǎng),又建立了新的神經(jīng)支配關(guān)系。嗅鞘細(xì)胞存在于嗅神經(jīng)及嗅球的神經(jīng)層上,沿嗅神經(jīng)的全長(zhǎng),從周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)到神經(jīng)分布。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠嗅鞘細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法、結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠嗅鞘細(xì)胞經(jīng)GFAP熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
葡萄糖含量測(cè)試盒
小鼠肌紅蛋白(MYO/MB)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠KiSS-1受體(KISS1R)elisa檢測(cè)試劑盒
全組織熒光顯微鏡間接檢測(cè)試劑盒(含熒光二抗)
人Corin elisa分析檢測(cè)試劑盒
活體細(xì)胞線粒體跟蹤試劑盒
大鼠鐵調(diào)素(Hepc)elisa檢測(cè)試劑盒
植物磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)活性
線粒體蘋(píng)果酸脫氫酶(MDHm)測(cè)試盒
原鈣粘蛋白γA5抗體 PCDHGA5
粘蛋白-5B抗體 MUC5B
分泌載體膜蛋白1抗體 SCAMP1
富含脯氨酸蛋白24抗體 PRR24
G蛋白偶聯(lián)受體激酶6抗體 GRK6
HS3ST3B1蛋白抗體 HS3ST3B1
凝血因子11輕鏈抗體 Factor XI light chain
前列環(huán)素合成酶抗體 CYP8A1
AF750標(biāo)記的神經(jīng)元核抗原抗體 NeuN, Alexa Flour 750 conjugated
APC標(biāo)記人CD33單克隆抗體 human CD33-APC
聚合酶延伸因子抗體 ELL
可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白22A17抗體 SLC22A17
TPRX1蛋白抗體 TPRX1
WD重復(fù)蛋白16抗體 WDR16
微管關(guān)聯(lián)蛋白RP/EB家族成員1抗體 MAPRE1
細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 Cdc25C
單克隆抗體小鼠來(lái)源 50ul、100ul
小鼠嗅鞘細(xì)胞石蠟切片組織AKT蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
小鼠c-fos elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
Lanoxin
產(chǎn)品類(lèi)型小分子抗體
小鼠牙髓干細(xì)胞
兔卵巢表面上皮細(xì)胞
RLE-6TN大鼠肺泡II型細(xì)胞
KP4-3人胰腺導(dǎo)管腺癌
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無(wú)菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。