
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠鼻腔粘膜上皮細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
鼻腔粘膜組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
鋪路石狀細胞
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1747
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常鼻腔粘膜組織。
2) 細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)或細胞角蛋白-19(CK-19)熒光染色為陽性。經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
3) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
4) 細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 成纖維 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)試劑。
細胞簡介:
鼻腔粘膜是覆蓋在動物體內(nèi)呼吸器官管腔內(nèi)壁的一層組織結(jié)構(gòu),由上皮組織和疏松結(jié)締組織構(gòu)成。鼻腔粘膜覆蓋于鼻腔表面,粘膜下方為軟骨、骨或骨骼肌。
上皮的垂直切面上,細胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀,為具有增殖分化能力的干細胞,部分子細胞向淺層移動?;讓右陨鲜菙?shù)層多邊形細胞,再上為幾層梭形或扁平細胞。僅靠近表面幾層細胞為扁平狀,基底層細胞能不斷分裂增生,以補充表層衰老或損傷脫落的細胞。復層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的,有利于復層扁平上皮的營養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IL-1ELISAKit
大鼠縫隙連接蛋白α1,43kDa(GJA1)elisa分析檢測試劑盒
43kDa(GJA1)ELISA kit
豚鼠白介素17(IL-17)elisa分析檢測試劑盒
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植物氧化應激活性氧(ROS)比色法定量檢測試劑盒(超氧陰離子)
大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)elisa檢測試劑盒
血液乳糖含量酶連續(xù)反應光譜法定量檢測試劑盒
小鼠I型膠原蛋白elisa分析檢測試劑盒
倉鼠白介素2(IL-2)elisa分析檢測試劑盒
IL-2 ELISA Kit
人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFB)elisa分析檢測試劑盒
HumanETFBELISAKit
組織環(huán)氧化酶(CYCLOOXYGENASE-1/2)總活性熒光定量檢測試劑盒
人P選擇素(P-Selectin)elisa檢測試劑盒
大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)elisa分析檢測試劑盒
小鼠生長分化因子11(GDF11)elisa檢測試劑盒
DNA結(jié)合蛋白C抗體
MSY2
下頜發(fā)育綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體
FAKD3
跨膜蛋白161A抗體 Anti-TMEM161A
周期素D相關(guān)蛋白抗體 Anti-RUNX1T1/ETO
核有絲分裂器NuMA蛋白抗體 Anti-NuMA
細胞骨架相關(guān)蛋白抗體 Anti-SM22 Alpha
Cy5標記的兔抗雞IgM
大鼠鼻腔粘膜上皮細胞小鼠白介素6(IL-6)elisa檢測試劑盒免費代測
硝酸還原酶(NR)測試盒
Hippocampus abundant gene transcript 1; Hippocampus abundant transcript; Hippocampus abundant transcript 1; Putative tetracycline transporter like protein; Tetracycline transporter like prot; MGC144858; rCG_28876; DKFZp564L0864; HIAT1_HUMAN.
大鼠鼻腔粘膜上皮細胞
兔肌腱干細胞
F81貓腎細胞
LK-2人非小細胞肺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。