培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠表皮干細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
皮膚組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
鋪路石狀細(xì)胞
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1657
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常皮膚組織。
2)細(xì)胞鑒定：p63與細(xì)胞角蛋白-14（CK-14）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 角質(zhì)形成 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
角質(zhì)形成細(xì)胞在基底層有一亞群，即表皮干細(xì)胞，它通過對稱或不對稱分裂產(chǎn)生短暫擴(kuò)增細(xì)胞，短暫擴(kuò)增細(xì)胞經(jīng)過幾代擴(kuò)增后便成為終末分化的表皮角質(zhì)細(xì)胞。表皮是一個可以持續(xù)自我更新的組織，因此表皮干細(xì)胞具有足夠的增殖潛力，表皮干細(xì)胞不僅在體內(nèi)平衡和創(chuàng)傷修復(fù)中其關(guān)鍵作用，而且是腫瘤發(fā)生和基因的主要靶標(biāo)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人精氨酸加壓素（AVP）elisa檢測試劑盒
獼猴骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)elisa檢測試劑盒
電鏡樣品固著液（2％Formalin 固著液）
小鼠結(jié)締組織生長因子（CTGF）elisa檢測試劑盒
大鼠層連蛋白/板層素(LN)elisa檢測試劑盒
組織中總磷酸鹽測試盒
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小鼠S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)elisa檢測試劑盒
F-box蛋白相關(guān)蛋白33抗體 FBXO33
FITC標(biāo)記人CD81單克隆抗體 human CD81/FITC
磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5H抗體 Synaptojanin 2
卵泡抑素相關(guān)蛋白1抗體 FSTL1
蛋白磷酸酶1調(diào)節(jié)亞基1c抗體 PPP1R1C
電壓門控鉀通道Kv8.2抗體 KCNV2
鋅指蛋白ZZZ3抗體 ZZZ3
溴化丙胺太林相關(guān)蛋白2抗體 STOML2
R3H卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 R3HCC1
RAS相關(guān)抑細(xì)胞生長蛋白1抗體 DIRAS1
絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶PGAM5抗體 PGAM5
四磷酸鳥苷水解酶抗體 HDDC3
肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體 ALS2CR4
脊髓性肌癥蛋白SMA抗體 Gemin 2
17號染色體開放閱讀框59抗體 C17orf59
5-溴脫氧尿嘧啶核苷（增殖標(biāo)志物）單克隆抗體 BrdU(Proliferation Marker)
組蛋白H3-K122（mono）甲基化檢測試劑盒
大鼠表皮干細(xì)胞TLR4 ELISA Kit
人胱抑素SN(CST1)elisa分析檢測試劑盒
interleukin-1 alpha; Hematopoietin 1; IL 1 alpha; IL1 alpha; IL 1; IL 1A; Il-1a; IL1; IL1A; IL1F1; ilia; Interleukin 1 alpha; Interleukin 1 alpha precursor; Interleukin1 alpha; Preinterleukin 1 alpha; Pro interleukin 1 alpha; Prointerleukin 1 alpha; IL1A_HUMAN. IL-1 α; IL-1α; IL1α; IL 1α; IL 1 α.
大鼠表皮干細(xì)胞
兔肌腱成纖維細(xì)胞
LMH雞肝癌細(xì)胞
LLC/GFP 小鼠肺癌細(xì)胞帶綠色熒光
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。