產(chǎn)品名稱
大鼠耳軟骨細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
耳組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭狀
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1673
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1） 組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的耳組織。
2) 細(xì)胞鑒定：Ⅱ型膠原(Collagen Ⅱ)熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長方式：梭狀，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 上皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)試劑。
細(xì)胞簡介：
彈性軟骨僅存在高等動物外耳廓、聽道、會咽等處。與其它軟骨相比，間質(zhì)中含有大量交織成網(wǎng)的彈性纖維，成網(wǎng)狀在軟骨內(nèi)排列，同時(shí)含有少量膠原纖維。目前，彈性軟骨大多被用于修復(fù)人類殘缺及畸形耳廓及其它美容修復(fù)。
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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AF594標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體 PAX6, Alexa Fluor 594 conjugated
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角蛋白相關(guān)蛋白KAP27.1抗體 KAP27.1
乙?；M蛋白H2B (Lys116)抗體 Histone H2B (Acetyl K116)
應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1重組兔單克隆抗體 STIP1
二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白5抗體 CRMP5
防凍蛋白IV型 (Danio rerio) 抗體 AFP4b
GRAMD1C蛋白抗體 GRAMD1C
G蛋白偶聯(lián)受體183抗體 GPR183
囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B VAPB
浦肯野細(xì)胞相關(guān)蛋白1抗體 Puratrophin 1
體液HHV6（HUMAN HERPESVIRUS 6）病毒
大鼠耳軟骨細(xì)胞Chicken IgM / Cy3
雌二醇單克隆抗體
26S proteasome non ATPase regulatory subunit 8; 26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 8; 26S proteasome regulatory subunit p31; 26S proteasome regulatory subunit RPN12; 26S proteasome regulatory subunit S14; AAV38494; HIP6; HYPF; MGC1660; Nin1p; P31; Proteasome (prosome macropain) 26S subunit non ATPase 8; PSMD8; PSMD8_HUMAN; Rpn12; S14.
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