
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠骨髓基質(zhì)干細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
骨髓血組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭形細胞
分類
大鼠原代細胞
貨號
A01X1679
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常骨髓血組織。
2) 細胞鑒定:CD90熒光染色為陽性
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代間充質(zhì)干 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)試劑。
細胞簡介:
骨髓基質(zhì)細胞在骨髓中數(shù)量**,是一類具有多向分化潛能的干細胞,其中部分細胞具有自我復(fù)制、分裂增殖與多向分化能力,在不同的培養(yǎng)條件下,可分化為骨、成骨、軟骨、神經(jīng)、脂肪等細胞。
公司正在出售的產(chǎn)品:
引物設(shè)計合成和酶切位點分析
KDEL受體抗體
KDEL Receptor
芳香基硫酸酯酶K抗體
ARSK
重組逆轉(zhuǎn)錄病毒穩(wěn)態(tài)表達細胞克隆凍存試劑盒
大鼠組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)elisa檢測試劑盒
糖漿乳果糖(lactulose)含量酶偶聯(lián)反應(yīng)比色法定量檢測試劑盒
小鼠白介素33(IL-33)elisa分析檢測試劑盒
NADSYN1蛋白抗體
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補體C4b-A蛋白抗體
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瞬時受體電位蛋白12抗體 Anti-TRPV4/TRP12
磷酸化磷酯酶Cγ1抗體 Anti-Phospho-PLC gamma 1/PLCG1(Tyr775)
牙齒發(fā)育相關(guān)蛋白Osr2抗體 Anti-OSR2
滑膜細胞凋亡抑制物1抗體 Anti-SYVN1/HRD1
磷酸化胰島素受體底物-1抗體
phospho-IRS1 (Tyr895)
DIRAS2蛋白抗體
DIRAS2
牛痘相關(guān)激酶1抗體(絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶VRK1) Anti-VRK1
尼曼匹克C1前體蛋白抗體 Anti-NPC1/Niemann Pick C1
磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶1抗體 Anti-phospho-ROCK1(Thr455/Ser456)
腦腫瘤抑癌蛋白1抗體 Anti-Tomoregulin-1
大鼠促性腺釋放(GnRH)elisa分析檢測試劑盒
大鼠骨髓基質(zhì)干細胞VIM ELISA Kit
人激肽釋放酶7(KLK 7)elisa分析檢測試劑盒
protein kinase N2; Serine/threonine-protein kinase N2; Protein kinase C-like 2; Protease-activated kinase 2; PAK-2; Cardiolipin activated protein kinase Pak2; MGC150606; MGC71074; PAK2; PRK2; PRKCL2; PRO2042; Protein kinase C like 2; Protein kinase C related kinase 2; Pak-2.
大鼠骨髓基質(zhì)干細胞
兔鞏膜成纖維細胞
B16-F10+LUC小鼠黑色素瘤細胞熒光素酶標(biāo)記
Lu-134-B人小細胞肺癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。