
細胞簡介:

角質(zhì)形成細胞是一種不斷分化的復(fù)層鱗狀上皮細胞,其分化的終階是形成角蛋白。根據(jù)角質(zhì)形成細胞的發(fā)展階段和特點,從內(nèi)向外可將其分為五層。基底細胞層又稱層,棘細胞層,顆粒層,透明層,角質(zhì)層。
角質(zhì)形成細胞的分化成熟表現(xiàn)為從基底層到向角質(zhì)層的逐漸移行。在單一移行過程中,角質(zhì)形成 ; 細胞的形狀和功能也逐漸發(fā)生著變化,從單層柱狀上皮的基底層到扁平的細胞核消失的角質(zhì)層。新生的基底細胞進入棘細胞層,然后上移到顆粒層的上層。
組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
皮膚組織 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1656 |
僅供科研研究實驗 |
細胞特性:
1) 細胞來源于實驗動物的正常皮膚組織。
2) 細胞鑒定:廣譜角蛋白 ((Pan Cytokeratin) 熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于 90% 。
4) 不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:上皮樣細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 角質(zhì)形成 細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實驗具體步驟:

(1)動物福利:小鼠麻醉犧牲/處死,或者斷頸處死;
(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,
利于后期細胞從組織塊中爬出來,同時能夠消除部分結(jié)締組織等)
(6)種植組織塊:將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次,每次5min,然后使用完全培養(yǎng)基(含有1X雙抗)洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后,可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時,然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);

(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率;
(8)貼壁細胞傳代:當(dāng)單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍,進行傳代,此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞,消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可,當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況,一旦達到消化完成(皺縮細胞≥70%)即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候,一定要輕柔/緩慢,不能吹打到組織塊,如果組織塊掉下來,大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中;
(9)鑒定:細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定,鑒定辦法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機械分散法的特點是簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品:
組織PAR1Bα激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)α-甘露糖苷酶1抗體
MAN1B1
17號染色體開放閱讀框77抗體
C17orf77
豚鼠球蛋白G(IgG)elisa檢測試劑盒
蛋氨肽酶(methionine aminopeptidase; aminopeptidase M)
體液總抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量檢測試劑盒
谷氨酰胺合成酶GS測試盒 50T/24樣 比色法
原鈣粘蛋白β11抗體
PCDHB11
凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
CARD6
內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液酸蛋白抗體 Anti-TEM1/CD248
蛋白酶活化受體4抗體 Anti-PAR4
磷酸化蛋白激酶Aβ抗體 Anti-phospho-PKA beta(Ser338)
神經(jīng)細胞囊泡循環(huán)蛋白4抗體 Anti-Synaptogyrin 4
FITC標記的兔抗牛IgG H&L
Rabbit Anti-Bovine IgG H&L / FITC
EFCAB1蛋白抗體
EFCAB1
鋅指蛋白909抗體 Anti-ZBTB1/ZNF909
核孔糖蛋白P62抗體 Anti-Nucleoporin p62
維甲酸受體RAR α/RAR α抗體 Anti-RAR alpha
固醇酰輔酶A脫氫酶1抗體 Anti-SCD1
大鼠CD19分子(CD19)elisa分析檢測試劑盒
大鼠角質(zhì)形成細胞TRH ELISA KIT
人堿性磷酸酶(ALP)elisa分析檢測試劑盒
Cardiac tetrodotoxin insensitive voltage dependent sodium channel alpha subunit; CDCD2; CMD1E; CMPD2; HB1; HB2; HBBD; HH1; ICCD; IVF; LQT3; PFHB1; Scn5a (gene name); Scn5a; SCN5A_HUMAN; Sodium channel protein cardiac muscle alpha subunit; Sodium channel protein cardiac muscle alpha-subunit; Sodium channel protein cardiac muscle subunit alpha; Sodium channel protein type 5 subunit alpha; Sodium channel protein type V alpha subunit; Sodium channel protein type V subunit alpha; SSS1; VF1; Voltage gated sodium channel alpha subunit Nav1.5; Voltage-gated sodium channel alpha subunit Nav1.5; Voltage-gated sodium channel subunit alpha Nav1.5.
大鼠角質(zhì)形成細胞
兔肝內(nèi)膽管上皮細胞
CT26+LUC小鼠結(jié)腸癌細胞熒光素酶標記
LX-2+GFP人肝星形細胞+GFP