
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠頸動脈內(nèi)皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
頸動脈組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣 多角形細(xì)胞
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1536
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)或血管假性血友病因子(vWF)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 原代內(nèi)皮 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
頸動脈存在于脊椎動物頸部的動脈。有頸外動脈和頸內(nèi)動脈,前者分布至頭頂部和顏面部,后者進(jìn)入顱內(nèi)分布至腦和眼眶內(nèi)。
內(nèi)皮細(xì)胞層是血液和其它組織的天然屏障。內(nèi)皮細(xì)胞功能病變是造成動脈粥樣硬化的主要原因。內(nèi)皮細(xì)胞同時會合成和分泌凝血和纖維蛋白溶解系統(tǒng)的增強(qiáng)和抑制物,以及影響血小板粘附和聚集的媒介物。它們同時也會分泌控制細(xì)胞增殖的蛋白來維持血管壁的健康。
內(nèi)皮細(xì)胞會分泌 t-PA和PAI-1等抗血栓因子以及響應(yīng)TNF-α,繼而分泌細(xì)胞因子GM-CSF,表達(dá)ICAM-1表面抗體,產(chǎn)生大量的一氧化氮和endotheli
公司正在出售的產(chǎn)品:
人50補(bǔ)體溶血單位(CH50)elisa檢測試劑盒
膀胱癌和乳腺癌過表達(dá)基因抗體
LENG4
葉綠體伴侶蛋白抗體
CPN10
細(xì)胞PDGF-A蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒
電轉(zhuǎn)移緩沖液10× 500ml
寡核苷酸探針非位素化學(xué)發(fā)光法RNA
小鼠骨形成蛋白(BMPs)elisa檢測試劑盒
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白15樣蛋白抗體
NLRC3
G蛋白偶聯(lián)受體GPR158蛋白抗體
GPR158
β-taxilin蛋白抗體 Anti-TXLNB
磷酸化親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIG抗體 Anti-Phospho-PPIG (Ser376)
多通道膜蛋白PTCHD2抗體 Anti-PTCHD2/DISP3
富含脯氨酸突觸相關(guān)蛋白SHANK2抗體 Anti-SHANK2
磷酸化原癌基因蛋白18抗體
phospho-STMN1 (Ser24)
嗅覺受體52K2抗體
OR52K2
信號通路WNT10A抗體 Anti-WNT10A
神經(jīng)細(xì)胞穿透素2抗體 Anti-NPTX2
RGAG4蛋白抗體 Anti-RGAG4
感覺神經(jīng)性耳聾常染色體隱性遺傳61抗體 Anti-Slc26a5
大鼠γ谷氨酸-半胱氨酸合成酶(γ-GCS)elisa分析檢測試劑盒
大鼠頸動脈內(nèi)皮細(xì)胞小鼠整合素α1(ITGα1)elisa檢測試劑盒
人層粘連蛋白(LN)elisa檢測試劑盒
Dysbindin protein homolog; Biogenesis of lysosome-related organelles complex 1 subunit 8; BLOC-1 subunit 8; CG6856-PA; CG6856; DTBP1_DROME.
大鼠頸動脈內(nèi)皮細(xì)胞
兔腹腔主動脈內(nèi)皮細(xì)胞
GBC-SD+LUC 人膽囊癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。