培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠前列腺基底細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
前列腺組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
不規(guī)則細(xì)胞
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1599
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1） 組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常前列腺組織。
2) 細(xì)胞鑒定：肌上皮標(biāo)記物(P63)熒光染色為陽(yáng)性。
3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代 基底 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)試劑。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
前列腺位于膀胱頸下方，包繞著膀胱口與尿道結(jié)合部位。
前列腺腺體主要由 3種細(xì)胞構(gòu)成，即分泌細(xì)胞、基底細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞?；准?xì)胞約占前列腺細(xì)胞總數(shù)的10%，不具有分泌功能，被認(rèn)為是前列腺的多潛能干細(xì)胞。
前列腺基底細(xì)胞是前列腺固有腺體中在分泌上皮和基底膜之間單層排列的一層細(xì)胞，核小，缺乏胞質(zhì)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)elisa檢測(cè)試劑盒
人蛋白酶3(PR3)elisa分析檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞磷酸甲羥戊酸激酶（phosphomevalonate kinase）活性
小鼠維生素B9(VB9)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)elisa檢測(cè)試劑盒
防脫載玻片經(jīng)APES處理 50片
細(xì)胞NF KAPPA B P65蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒
馬白介素6(IL-6)elisa分析檢測(cè)試劑盒
味覺(jué)2型受體蛋白家族49抗體 TAS2R49
細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 BIN3
src原癌基因單克隆抗體 SRC
TRIM43B蛋白抗體 TRIM43B
AF680標(biāo)記的上皮細(xì)胞粘附分子（CD326）抗體 EpCAM, Alexa Fluor 680 conjugated
AF750標(biāo)記的造血干細(xì)胞抗原CD133抗體 CD133, Alexa Fluor 750 conjugated
緊密連接蛋白2單克隆抗體 Claudin 2
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白126抗體 CCDC126
原鈣粘蛋白γA1抗體 PCDHGA1
粘蛋白20抗體 MUC20
分泌型磷脂酶A2亞基5抗體 Secretory phospholipase A2 Type V
富含脯氨酸蛋白18抗體 PRR18
G蛋白偶聯(lián)受體γ4抗體 G gamma4
HRP標(biāo)記的人CD34單克隆抗體 CD34, HRP conjugated
凝血酶原酶/維介素抗體 FGL2
羥乙基淀粉抗體 Hydroxyethyk starch
大鼠促黃體 （LH）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠前列腺基底細(xì)胞Mouse Anti-Human IgG H&L / AP
FBXW5蛋白抗體
C15orf30; Chromosome 15 open reading frame 30; EC 2.4.2.30; FLJ25281; PAR16_HUMAN; PARP 16; PARP-16; Parp16; Poly (ADP ribose) polymerase family member 16; Poly [ADP ribose] polymerase 16; Poly [ADP-ribose] polymerase 16.
大鼠前列腺基底細(xì)胞
兔鼻腔粘膜上皮細(xì)胞
K1(GLAG-66)人甲狀腺癌細(xì)胞
MDA-MB-415人乳腺癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。