
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腦組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
圓形細(xì)胞
分類
大鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1706
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常腦組織。
2)細(xì)胞鑒定:CD68熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:圓形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代 星形膠質(zhì) 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
小膠質(zhì)細(xì)胞分布于整個系統(tǒng),是神經(jīng)系統(tǒng)小的一種膠質(zhì)細(xì)胞,約占整個膠質(zhì)細(xì)胞的 5-10%。作為常駐神經(jīng)系統(tǒng)的效應(yīng)細(xì)胞,小膠質(zhì)細(xì)胞及其介導(dǎo)的神經(jīng)炎癥在神經(jīng)系統(tǒng)的損傷及的轉(zhuǎn)歸過程中起著非常重要的作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
PorcineSP-AELISAKit
大鼠谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶Mu1(GSTM1)elisa分析檢測試劑盒
GSTM1 ELISA kit
豚鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa分析檢測試劑盒
PAPELISAKit
FHOD3蛋白抗體 Anti-FHOD3
孤兒核受體抗體 Anti-ROR Gamma/RORC/NR1F3
膜內(nèi)在蛋白NOD26抗體 Anti-NLRX1/NOD26/NOD9
內(nèi)臟異位相關(guān)蛋白/鋅指蛋白203抗體 Anti-ZIC3
猴可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)elisa分析檢測試劑盒
sICAM-1 ELISA Kit
人泛素結(jié)合酶E2D1(UBC4/ 5的源物,酵母)(UBE2D1)elisa分析檢測試劑盒
UBE2D1ELISAkit
小鼠細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)elisa分析檢測試劑盒
大鼠白介素1受體樣1(IL1RL1)elisa分析檢測試劑盒
人血液球蛋白M(IgM)比濁法定量檢測試劑盒
人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)elisa檢測試劑盒免費代測
減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體
MNS1
1號染色體開放閱讀框77抗體
C1orf77
硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2抗體 Anti-TXNIP
絲氨酸蘇氨酸激酶1受體相互作用蛋白抗體 Anti-RIPK-1/RIP
非霍奇金瘤重復(fù)蛋白3抗體 Anti-NHLRC3
鳥嘌呤核苷酸交換因子VAV3抗體 Anti-VAV3
PE-Cy3標(biāo)記的兔抗豬IgG H&L
大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞Mink IgG / RBITC
G蛋白偶聯(lián)受體101抗體
1 8D; Dispanin subfamily A member 2c; DSPA2c; IFITM 2; Interferon induced transmembrane protein 2 (1 8D); I_HUMAN; Interferon induced transmembrane protein 2; Interferon inducible protein 1 8D.
大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞
人胰腺星狀細(xì)胞
SHP-77人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
MHCC-97L人高轉(zhuǎn)移性肝癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。