
細胞簡介:

脂肪血管基質(zhì)組分( stromal vascular fraction,SVF)即脂肪組織去除成熟脂肪細胞后,所獲得的具有干
組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
脂肪組織 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1680 |
僅供科研研究實驗 |
細胞特性:
1) 組織來源于實驗動物的正常脂肪組織。
2) 細胞鑒定: CD44熒光染色為陽性。
3) 經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5) 細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf原代間充質(zhì)干 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)試劑。
實驗具體步驟:

(1)動物福利:小鼠麻醉犧牲/處死,或者斷頸處死;
(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,
利于后期細胞從組織塊中爬出來,同時能夠消除部分結(jié)締組織等)
(6)種植組織塊:將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次,每次5min,然后使用完全培養(yǎng)基(含有1X雙抗)洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后,可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時,然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);

(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率;
(8)貼壁細胞傳代:當(dāng)單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍,進行傳代,此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞,消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可,當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況,一旦達到消化完成(皺縮細胞≥70%)即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候,一定要輕柔/緩慢,不能吹打到組織塊,如果組織塊掉下來,大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中;
(9)鑒定:細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定,鑒定辦法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機械分散法的特點是簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品:
全組織衰老特異性早期脂褐素蘇丹黑原位染色試劑盒
鈣激活鉀通道蛋白β3抗體
KCNMB3
二磷酸腺苷核糖基化因子6相互作用蛋白抗體
ARL6
人堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)elisa檢測試劑盒
果菜抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒
豬促生長釋放(GHRH)elisa分析檢測試劑盒
大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)elisa檢測試劑盒
肌球蛋白9A抗體
Myosin IXA
3號染色體開放閱讀框36抗體
C3orf36
微管相關(guān)蛋白Tau421抗體 Anti-Tau421
N-乙?;D(zhuǎn)移酶2抗體 Anti-PNAT/NAT2
富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 Anti-NALP2/PAN1/PYPAF2
磷酸化非受體型蛋白激酶抗體 Anti-Phospho-Syk (Tyr525/526)
人巨細胞病毒單克隆抗體
HCMV(1F11)
DHX40蛋白抗體
DHX40
S100A9抗體 Anti-S100-A9/MRP14/CFAG/Calgranulin B
神經(jīng)特異性蛋白2抗體 Anti-NSPL2/RTN3
ras癌基因家族Rab8蛋白/原癌基因c MEL抗體 Anti-RAB8
腫瘤血管內(nèi)皮標記相關(guān)蛋白質(zhì)7抗體 Anti-TEM7R/Plxdc2
大鼠膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)elisa分析檢測試劑盒
大鼠脂肪血管基質(zhì)細胞IL-5 ELISA KIT
人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)elisa分析檢測試劑盒
UB2E2_HUMAN; UBC4/5 homolog yeast; UBCH 8; UbcH8; Ube2e2; Ubiquitin carrier protein E2; Ubiquitin conjugating enzyme E2 E2; Ubiquitin conjugating enzyme E2E 2 (homologous to yeast UBC4/5); Ubiquitin conjugating enzyme E2E 2 (UBC4/5 homolog yeast); Ubiquitin conjugating enzyme E2E 2; Ubiquitin protein ligase E2; Ubiquitin-conjugating enzyme E2 E2; Ubiquitin-protein ligase E2.
大鼠脂肪血管基質(zhì)細胞
人牙齦成纖維細胞
XWLC-05云南宣威人肺腺癌細胞系
Molp-8人多發(fā)性骨髓瘤