
細胞簡介:

樹突狀細胞( Dendritic cells, DC)是機體功能強的專職抗原遞呈細胞,它能高效地攝取、加工處理和遞呈抗原,未成熟DC具有較強的遷移能力,成熟DC能有效激活初始型T細胞,處于啟動、調控、并維持應答的中心環(huán)節(jié)。
DC的來源有兩條途徑:①髓樣干細胞在GM-CSF的刺激下分化為DC,稱為髓樣DC,也稱DCl,與單核細胞和粒細胞有共同的前體細胞;包括朗格漢斯細胞,間皮(或真皮)DCs以及單核細胞衍生的DCs等,②來源于樣干細胞,稱為樣DC或漿細胞樣DC,即DC2,與T細胞和NK細胞有共同的前體細胞。
組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
外周血組織 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X2177 |
僅供科研研究實驗 |
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常外周血組織。
2)細胞鑒定:CD11c熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:不規(guī)則細胞,半貼壁半懸浮培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 樹突狀( DC) 細 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實驗具體步驟:

(1)動物福利:小鼠麻醉犧牲/處死,或者斷頸處死;
(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,
利于后期細胞從組織塊中爬出來,同時能夠消除部分結締組織等)
(6)種植組織塊:將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次,每次5min,然后使用完全培養(yǎng)基(含有1X雙抗)洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后,可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時,然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);

(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率;
(8)貼壁細胞傳代:當單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍,進行傳代,此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞,消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可,當然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況,一旦達到消化完成(皺縮細胞≥70%)即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候,一定要輕柔/緩慢,不能吹打到組織塊,如果組織塊掉下來,大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應的培養(yǎng)皿/瓶中;
(9)鑒定:細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定,鑒定辦法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機械分散法的特點是簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品:
αNAGELISAKit
鴨子刺鼠相關蛋白(AGRP)elisa分析檢測試劑盒
AGRP ELISA Kit
人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)elisa分析檢測試劑盒
CPELISAKit
細胞GSK-3ALPHA蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
牛elisa分析檢測試劑盒
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小鼠晶狀體蛋白αB(CRYαB)elisa檢測試劑盒
整合素和生長因子樣蛋白1抗體
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信號轉導蛋白9復合體7b抗體
CSN7b
突觸蛋白6抗體 Anti-SynaptotagminVI
多功能DNA修復酶抗體 Anti-REF1/APEX1
核蛋白易位啟動子區(qū)域TPR抗體 Anti-Nucleoprotein TPR
鋅指蛋白913抗體 Anti-zbtb11/ZNF913
肌動蛋白依賴染色質調控因子SMARCD3蛋白抗體
SMARCD3
黑色素瘤相關抗原B16抗體
MAGEB16
溶質載體家族蛋白21成員1C1抗體 Anti-SLCO1C1/OATP-F
磷酸化血小板源性生長因子受體α Anti-Phospho-PDGFRA(Tyr762)
p21激活激酶2抗體 Anti-PAK2
磷酸化NF-κB活化激酶抗體 Anti-Phospho-TBK1/NAK (Ser172)
Alexa Fluor 647標記羊IgG(型對照)
兔DC細胞Mouse Anti-Rabbit IgM / Cy5
唾液酸結合球蛋白樣凝集素9抗體
UBA80; UBCEP1; 40S ribosomal protein S27a; RS27A_HUMAN.
兔DC細胞
人肝內膽管上皮細胞
SCaBER人膀胱癌細胞
RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞