
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
腸組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
不規(guī)則細(xì)胞
分類
兔原代細(xì)胞
貨號
A01X2072
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常腸組織。
2)細(xì)胞鑒定:GFAP熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
腸神經(jīng)系統(tǒng)膠質(zhì)細(xì)胞類似神經(jīng)系統(tǒng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞,腸神經(jīng)系統(tǒng)以網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)廣泛分布于漿膜下層、縱肌層、肌間層、環(huán)肌層、深肌層、粘膜肌層和粘膜層。腸神經(jīng)膠質(zhì)主要位于腸肌間叢和粘膜下叢神經(jīng)節(jié),與神經(jīng)節(jié)交織成團(tuán)并與節(jié)間神經(jīng)束相互連接。腸神經(jīng)膠質(zhì)不但對神經(jīng)系統(tǒng)起支持作用,還在調(diào)控神經(jīng)元生長、發(fā)育、神經(jīng)回路功能和細(xì)胞凋亡過程中起重要作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Pigc-fosELISAKit
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粘蛋白19抗體
MUC19
補(bǔ)體C2b鏈多肽抗體
C2b
轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體 Anti-TCERG1/CA150
環(huán)指蛋白2抗體 Anti-RING2/RNF2
鈉鈣交換蛋白2抗體 Anti-NCX2/SLC8A2
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白1抗體 Anti-SMC1
辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗豬IgG H&L
兔腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)elisa分析檢測試劑盒
大鼠B因子(BF)elisa分析檢測試劑盒
PKC gamma; PKCC; PKC-gamma; PKCG; PRKCG; Protein kinase C gamma; Protein kinase C gamma polypeptide; Protein kinase C gamma type; SCA 14; SCA14. PKC-γ; PKC γ; PKCγ; Protein kinase γ.
兔腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞
人肝癌細(xì)胞
SK-MEL-2人黑素瘤細(xì)胞
RGC-5小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。