
細胞簡介:

肝臟是人體中大的腺體,也是大的實質(zhì)性臟器。肝間質(zhì)細胞屬于成體干細胞,已有研究發(fā)現(xiàn)它可以向骨、軟骨、肌腱、脂肪、等分化。成體干細胞的向肌細胞的分化使得很多肌肉退行性、遺傳性的多了一種更佳的選擇。
組織來源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號 |
用途 |
肝組織 |
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
A01X2066 |
僅供科研研究實驗 |
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常肝組織。
2)細胞鑒定:CD44熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 間質(zhì) 細 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實驗具體步驟:

(1)動物福利:小鼠麻醉犧牲/處死,或者斷頸處死;
(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,
利于后期細胞從組織塊中爬出來,同時能夠消除部分結(jié)締組織等)
(6)種植組織塊:將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次,每次5min,然后使用完全培養(yǎng)基(含有1X雙抗)洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后,可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時,然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);

(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率;
(8)貼壁細胞傳代:當單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍,進行傳代,此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞,消化時間根據(jù)正常細胞消化時間即可,當然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況,一旦達到消化完成(皺縮細胞≥70%)即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候,一定要輕柔/緩慢,不能吹打到組織塊,如果組織塊掉下來,大概率是不會再貼壁成功啦。根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中;
(9)鑒定:細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定,鑒定辦法包括:RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術(shù)等。實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機械分散法的特點是簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產(chǎn)品:
甲酸含量測試盒
磷酸肌醇磷酸酶蛋白INPP5抗體
INPP5F
4號染色體開放閱讀款
C4orf45
冰凍切片組織IP3R受體蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
犬P選擇素(SELP)elisa分析檢測試劑盒
大鼠11β羥類固醇脫氫酶1型(11β-HSD1)elisa檢測試劑盒
小鼠可溶性CD30配體(sCD30L)elisa分析檢測試劑盒
腦蛋白239抗體
MPPED2
EI2BL/MRI1蛋白抗體
EI2BL/MRI1
酮基移換酶樣蛋白1抗體 Anti-TKTL1
磷酸化原癌基因蛋白激酶受體RET抗體 Anti-phospho-Ret/HSCR1(Tyr1062)
孤菲肽/痛敏肽抗體 Anti-Nociceptin
膽固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白2抗體 Anti-SREBP-2
泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體
UBE2A
粒細胞相關(guān)分化標志物樣蛋白2抗體
MYADML2
雌調(diào)節(jié)蛋白LIV1/鋅轉(zhuǎn)運蛋白抗體 Anti-LIV-1/SLC39A6
Nemo樣激酶抗體 Anti-Nemo-like kinase
磷酸化P21蛋白激活的蛋白激酶6 Anti-phospho-PAK6(Ser165)
轉(zhuǎn)錄增強因子TEF4抗體 Anti-TEF4/TEA domain family member 2
大鼠肝細胞生長因子激活物(HGFA)elisa分析檢測試劑盒
兔肝間質(zhì)細胞Mouse Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE-Cy5.5
成纖維細胞生長因子14抗體
65 kDa glutamic acid decarboxylase; DCE 2; DCE2; GAD 2; GAD 65; GAD-2; GAD-65;GAD 65, GAD2; Glutamate Decarboxylase 2 (pancreatic islets and brain 65kDa); Glutamate Decarboxylase 2; Glutamate Decarboxylase 65; Glutamate decarboxylase 65 kDa isoform; Glutamic Acid Decarboxylase 2; Glutamic Acid Decarboxylase 65.
兔肝間質(zhì)細胞
人肺癌細胞
SW620+luc人結(jié)直腸腺癌細胞+luc
RT112/84人膀胱癌細胞