
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔膈肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
膈肌組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭狀細胞
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2159
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)細胞來源于實驗動物正常膈肌組織。
2)細胞鑒定:肌動蛋白(α-actin)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭狀細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代骨骼肌細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
膈肌是位于胸腔與腹腔之間的肌肉纖維組織,其周圍為肌腹,中央為腱膜,是機體重要的呼吸肌。
組織學上,膈肌屬骨骼肌,成熟的骨骼肌纖維不具有增殖能力。骨骼肌衛(wèi)星細胞是骨骼肌與肌膜之間的一種體積較小的細胞,排列在肌纖維的表面,當肌纖維損傷后,可分化為肌纖維修復損傷。隨著組織發(fā)育的成熟,肌衛(wèi)星細胞數(shù)量相對減少。
公司正在出售的產(chǎn)品:
MHBELISAKit
倉鼠白介素6(IL-6)elisa分析檢測試劑盒
IL-6 ELISA Kit
人淀粉狀蛋白β(A4)前體蛋白結合家族B成員1(FE65)elisa分析檢測試劑盒
HumanFE65ELISAkit
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犬α1微球蛋白(α1-MG)elisa檢測試劑盒
大鼠12羥二十烷四烯酸(12-HETE)elisa檢測試劑盒免費代測
小鼠可溶性CD40配體(sCD40L)elisa檢測試劑盒免費代測
IQCK蛋白抗體
IQCK
碳酸酐酶11抗體
CA XI
通用型魚氣單細胞菌屬(Aeromonas salmonicida)
小鼠白介素1α(IL1α)elisa檢測試劑盒
大鼠主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/AgBⅡ/H-1Ⅱ)elisa檢測試劑盒
線粒體復合物III蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
RAB3-GTP酶激活蛋白催化亞單位1抗體
RAB3GAP1
神經(jīng)長卷曲螺旋蛋白2抗體
JAKMIP3
泛素化組蛋白H2AX抗體 Anti-Histone H2A.X (Ubiquityl Lys119)
泛酸激酶3抗體 Anti-PANK3
血小板白細胞C激酶底物源結構域M2抗體 Anti-PLEKHM2/SKIP
磷酸化神經(jīng)生長相關蛋白SCG10抗體 Anti-phospho-STMN2/SCG10 (Ser50)
PE-Cy3標記的羊抗兔IgG H&L
兔膈肌細胞Mouse Anti-Guinea Pig IgG H&L / PE-Cy7
突觸糖蛋白2抗體
D-fructose-6-phosphate amidotransferase 1; GFA; GFAT 1; GFAT; GFAT1; GFAT1m; GFPT; Gfpt1; GFPT1_HUMAN; Glucosamine--fructose-6-phosphate aminotransferase [isomerizing] 1; Glutamine--fructose-6-phosphate transaminase 1; Glutamine:fructose 6 phosphate amidotransferase 1; Hexosephosphate aminotransferase 1.
兔膈肌細胞
人膽囊微血管內皮細胞
A129L人非小細胞肺癌細胞
RWPE-2 人前列腺正常細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。