
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
兔骨髓基質干細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
骨髓血組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭形細胞
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2171
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常骨髓血組織。
2)細胞鑒定:CD90熒光染色為陽性
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代間充質干細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
骨髓基質細胞在骨髓中數(shù)量**,是一類具有多向分化潛能的干細胞,其中部分細胞具有自我復制、分裂增殖與多向分化能力,在不同的培養(yǎng)條件下,可分化為骨、成骨、軟骨、神經(jīng)、脂肪等細胞。
公司正在出售的產品:
豬環(huán)磷酸鳥苷(cGMP)elisa檢測試劑盒
鉀離子通道蛋白17抗體
KCNK17
G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體
ARHGEF18
線粒體二羧酸載體蛋白抗體 Anti-SLC25A10
染色體濃縮調控蛋白1抗體 Anti-RCC1
螺旋環(huán)螺旋蛋白2抗體 Anti-NHLH2
乳腺癌相關基因2抗體(鋅指蛋白364) Anti-ZNF364/BCA2/RNF115
肌球蛋白1B抗體
MYO1B
3號染色體開放閱讀框22抗體
C3orf22
谷氨酰胺轉胺酶6抗體 Anti-TGase6/Transglutaminase 6
G蛋白信號調節(jié)因子14抗體 Anti-RGS14
老年性癡呆蛋白APH2抗體 Anti-Nicastrin
分泌素受體抗體 Anti-Secretin receptor
補體C3抗體
Complement C3
ATP-依賴的RNA解旋酶29抗體
DHX29
蛋白剪接變異體蛋白抗體 Anti-SVH/ARMC10
丙型肝炎NS4B(65kDa)抗體 Anti-Hepatitis C Virus RNA-directed RNA polymerase
GTP結合蛋白RAC1+RAC2抗體 Anti-RAC1+RAC2
甲狀腺受體α1+α2抗體 Anti-THRA1+2
大鼠蛋白激酶C(PKC)elisa分析檢測試劑盒
兔骨髓基質干細胞PV-Ab Elisa kit
豚鼠白蛋白elisa分析檢測試劑盒
2610016K11Rik; AU042285; C87209; G6S; Glucosamine (N-acetyl) 6 sulfatase; Glucosamine 6 sulfatase; Glucosamine-6-sulfatase; GNS; GNS_HUMAN; MGC21274; N acetylglucosamine 6 sulfatase [Precursor]; N-acetylglucosamine-6-sulfatase; N28088.
兔骨髓基質干細胞
人腸微血管內皮細胞
HCCC-9810人肝癌細胞
SCC-9人類鱗狀上皮舌癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。