
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開(kāi)腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好,可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
兔肌腱細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
肌腱組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭形細(xì)胞
分類(lèi)
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2169
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的肌腱組織。
2)細(xì)胞鑒定:Ⅰ型膠原熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 肌腱 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
肌腱細(xì)胞是肌腱組織的基本功能單位,主要合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和糖蛋白基質(zhì),維持肌腱組織的新陳代謝。
肌腱損傷后的方式包括內(nèi)源性和外源性,而理想的方式是控制外源性,促進(jìn)內(nèi)源性。內(nèi)源性的機(jī)制是肌腱細(xì)胞通過(guò)細(xì)胞自身的增殖從而促進(jìn)肌腱,但目前肌腱細(xì)胞在體外經(jīng)過(guò)多次傳代培養(yǎng)后會(huì)喪失分裂增殖能力。
目前已知多種因素影響肌腱過(guò)程,其中與肌腱關(guān)系密切的有著重要調(diào)控作用的細(xì)胞因子主要有:堿性成纖維生長(zhǎng)因子,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 β,骨形態(tài)發(fā)生蛋白-12,血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子,胰島素樣生長(zhǎng)因子-1,血小板源性生長(zhǎng)因子等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
IDUAELISAKit
鴨球蛋白E(IgE)elisa分析檢測(cè)試劑盒
IgE ELISA Kit
人百日咳病毒抗體(IgA)elisa分析檢測(cè)試劑盒
HumanbordetellapertussisantibodyIgAELISAkit
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人17羥孕酮(17-OHP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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LIN37蛋白抗體
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環(huán)子孢子蛋白(約氏瘧原蟲(chóng))抗體
CSP
沉默調(diào)節(jié)樣蛋白SirT7抗體 Anti-SIRT7
核受體RXRα抗體 Anti-RXR Alpha/RXRA/Retinoid X receptor
腎病樣蛋白2抗體 Anti-NLG1/KIRREL2
鋅指蛋白415抗體 Anti-ZNF415
平滑肌肌球蛋白重鏈重組兔單克隆抗體
smooth muscle Myosin heavy chain 11
微纖絲相關(guān)糖蛋白抗體
MAGP1
跨膜蛋白SEMA4B抗體 Anti-SEMA4B
髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體 Anti-PKMYT1
磷酸化p21激活激酶4/5/6抗體 Anti-Phospho-PAK4(Ser474)/PAK5(Ser602)/PAK6(Ser560)
轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β活化激酶1 Anti-TAK1/MAP3K7
PE標(biāo)記大鼠IgG(型對(duì)照)
兔肌腱細(xì)胞Mouse Anti-Human IgM / Cy7
精子頂體膜相關(guān)蛋白4抗體
EST2; hEST2; TCS1; Telomerase associated protein 2; Telomerase Catalytic Subunit; Telomere Reverse Transcriptase; Telomerase reverse transcriptase; TERT; TP2; TRT; TERT_HUMAN; Telomerase reverse transcriptase; HEST2; Telomerase catalytic subunit; Telomerase-associated protein 2.
兔肌腱細(xì)胞
人扁桃體間質(zhì)細(xì)胞
GSU人胃癌細(xì)胞
SGC-7901人胃癌細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無(wú)菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。