培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱(chēng)
兔卵巢表面上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來(lái)源
卵巢組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
圓形、卵圓形或多角形細(xì)胞
分類(lèi)
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2122
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常卵巢組織。
2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞角蛋白-19（CK-19）熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：圓形、卵圓形或多角形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 上皮 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
大約 85%的卵巢癌來(lái)源于卵巢表面上皮，它的發(fā)生是一個(gè)多因素作用、多基因參與、經(jīng)過(guò)多個(gè)階段才終形成的及其復(fù)雜的生物學(xué)過(guò)程。因此，體外培養(yǎng)卵巢表面上皮細(xì)胞為研究卵巢表面上皮的功能及其逐步癌變過(guò)程對(duì)卵巢癌的防治起著重要作用。此外，有研究表明，表皮生長(zhǎng)因子對(duì)卵巢表面上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)和狀態(tài)十分有益。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人游離膽固醇（fCHOL）elisa檢測(cè)試劑盒
犬脂肪酸結(jié)合蛋白（FABP）elisa檢測(cè)試劑盒
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小鼠抗Smith抗體(Sm)elisa檢測(cè)試劑盒
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鋅指蛋白677抗體 ZNF677
鋅指蛋白ZIC5抗體 ZIC5
腸致病性大腸桿菌抗體 E.coli
醋酸阿托西班抗體 Atosiban, Acetate
E3泛素連接酶MUL1抗體 MUL1
ESF1蛋白抗體 ESF1
磷酸化蓬亂蛋白2抗體 phospho-Dishevelled 2 (Thr224)
磷酸化細(xì)胞核受體Rev-Erbα抗體 Phospho-NR1D1 (Ser55 + Ser59)
組蛋白去乙酰化酶7抗體 HDAC7
17-β-羥脫氫酶6抗體 HSD17B6
紅細(xì)胞分化相關(guān)基因蛋白抗體 Hemogen
環(huán)指蛋白74抗體 RNF74
PE-Cy5標(biāo)記小鼠CD45RB單克隆抗體 mouse CD45RB/PE-Cy5
PE標(biāo)記人CD26單克隆抗體 human CD26/PE
神經(jīng)粘蛋白抗體 Neurocan
絲氨酸蛋白酶38抗體 Marapsin2/PRS38
蔗糖含量測(cè)試盒
兔卵巢表面上皮細(xì)胞小鼠NAD依賴(lài)性蛋白脫乙酰酶sirtuin-1(SIRT1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠血小板激活因子(PAF)elisa檢測(cè)試劑盒
Fibronectin-like domain containing leucine rich transmembrane protein 1; Fibronectin-like domain-containing leucine-rich transmembrane protein 1; FLRT1; FLRT1_HUMAN; Leucine rich repeat transmembrane protein FLRT1; Leucine-rich repeat transmembrane protein FLRT1.
兔卵巢表面上皮細(xì)胞
雞氣管上皮細(xì)胞
COLO 829人黑素瘤細(xì)胞
SK-MEL-5人黑素瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。