培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔毛囊角質(zhì)細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
皮膚組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
鋪路石狀細(xì)胞
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2154
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常皮膚組織。
2)細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 角質(zhì)形成 細(xì) 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
毛囊作為一種重要的皮膚附屬器官，為顯著的特點(diǎn)是始終處于生長(zhǎng)期、退行期和休止期的周期性循環(huán)中。在毛囊的形態(tài)學(xué)和周期性循環(huán)中，毛囊的角質(zhì)細(xì)胞作為一種特殊類型的角質(zhì)形成細(xì)胞，受毛細(xì)胞分泌的一些細(xì)胞因子或信號(hào)因子等作用，迅速發(fā)生分化增殖或凋亡，進(jìn)而誘導(dǎo)毛囊進(jìn)入生長(zhǎng)期或退行期。
公司正在出售的產(chǎn)品：
TEELISAKit
骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
OT/BGP ELISA Kit
人蛋白激酶C beta II(PKC-bII)elisa分析檢測(cè)試劑盒
PKC-bIIELISAKit
細(xì)胞SPHK激酶總活性熒光定量檢測(cè)試劑盒
人Dickkopf 1(DKK1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠P0蛋白(p0)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠前列腺素G/H合酶1(PTGS1)elisa分析檢測(cè)試劑盒
組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶MORF抗體
KAT6B
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體
CCDC47
大鼠磷酸酶張力蛋白源物(PTEN)elisa檢測(cè)試劑盒
全血線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒
雌三醇（E3）含量ELISA測(cè)試盒
通用型雞敗血支原體（Mycoplasma；MG）基因檢測(cè)試劑盒
核糖核酸酶6抗體
Ribonuclease 6
驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員15抗體
KIF15
14-3-3τ蛋白抗體 Anti-14-3-3 Tau
原鈣粘附蛋白17抗體 Anti-PCDH17
蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基1B抗體 Anti-PPP2R1B
泛素特異性蛋白酶9X抗體 Anti-USP9X
Cy7標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG H&L
兔毛囊角質(zhì)細(xì)胞磷脂酰肌醇PI（phosphatidylinositol）高效液相色譜法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠抑制素A(INH-A)elisa檢測(cè)試劑盒
DKFZp686M05248; MGC102856; MGC42116; MTDPS8A; MTDPS8B; p53 inducible ribonucleotide reductase small subunit 2 homolog; p53 inducible ribonucleotide reductase small subunit 2 like protein; p53 R2; p53-inducible ribonucleotide reductase small subunit 2-like protein; p53R2; Ribonucleoside diphosphate reductase M2 subunit B; Ribonucleoside-diphosphate reductase subunit M2 B; Ribonucleotide reductase M2 B (TP53 inducible); Ribonucleotide reductase M2 B; Ribonucleotide reductase small subunit like 2 p53 inducible; RIR2B_HUMAN; RRM 2B; RRM2B; TP53 inducible ribonucleotide reductase M2 B; TP53-inducible ribonucleotide reductase M2 B.
兔毛囊角質(zhì)細(xì)胞
狗腸神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞
A172人腦部多形性成釉細(xì)胞瘤細(xì)胞
SK-NEP-1人腎母細(xì)胞瘤細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。