培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除，然后將肝組織反復剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞，這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔皮膚成纖維細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
皮膚組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭形細胞
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2147
用途
僅供科研實驗
細胞特性：
1）組織來源于實驗動物的正常皮膚組織。
2)細胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式：長梭形細胞，不規(guī)則細胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 成纖維 細 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介：
成纖維細胞屬于由中胚層分化而來的間質(zhì)細胞。由于這些細胞非常容易培養(yǎng)，它們已經(jīng)被廣泛用于細胞和分子生物學研究中。一般而言，成纖維細胞能夠分泌 I型和III型膠原等細胞外基質(zhì)，并且研究表明不同器官中的成纖維細胞有顯著的不同。傷口修復時，真皮成纖維細胞由可增殖，可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的，可重塑基質(zhì)的表型，同時，它們會分泌大量的透明質(zhì)酸來應對修復時的炎癥反應。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人肝細胞生長因子(HGF)elisa分析檢測試劑盒
胰島素樣生長因子結合蛋白3(IGFBP-3)elisa分析檢測試劑盒
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效應細胞蛋白酶受體1抗體 EPR1
鋅指蛋白280抗體 SUHW1/ZNF280
半乳糖基轉(zhuǎn)移酶2抗體 C1GALT1C1
丙型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關的基因10蛋白抗體 CHCHD2
CTDSPL蛋白抗體 CTDSPL
DNA-RNA雜交體單克隆抗體 DNA-RNA Hybrid
磷酸化癌基因ETS2抗體 phospho-ETS2 (Thr72)
磷酸化谷氨酸受體1抗體 phospho-GluR1 (Ser645)
轉(zhuǎn)錄因子E2F7抗體 E2F7
珠蛋白相關蛋白1/肺炎分泌蛋白1抗體 SCGB3A2
合胞素1抗體 Syncytin 1
核糖體蛋白L5抗體 RPL5
NIPSNAP1蛋白抗體 NIPSNAP1
p21激活激酶3抗體 PAK3
三磷酸腺苷結合轉(zhuǎn)運蛋白G超家族成員5抗體 ABCG5
受體5抗體 Somatostatin Receptor 5
超敏型ECL化學發(fā)光顯影試劑盒
兔皮膚成纖維細胞Mouse Anti-Human IgM / PE-Cy5.5
溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運蛋白家族37成員A4抗體
KCNK 9; KCNK-9; TASK3; Potassium channel subfamily K member 9; Acid-sensitive potassium channel protein TASK-3; TWIK-related acid-sensitive K(+) channel 3; Two pore potassium channel KT3.2; Short=Two pore K(+) channel KT3.2; KCNK9_HUMAN
兔皮膚成纖維細胞
大鼠中耳上皮細胞
小鼠
Snu-387人肝癌細胞
原代細胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。