
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
臍血。
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
梭形細(xì)胞
分類
兔原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2251
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)細(xì)胞來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的臍血。
2)細(xì)胞鑒定:CD44熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
臍帶血是胎兒出生時(shí)臍帶內(nèi)及胎盤近胎兒一側(cè)血管內(nèi)的血液。臍帶血中含有多種成分。目前,臍帶血已經(jīng)成為公認(rèn)的造血干細(xì)胞的重要來源之一。此外,臍帶血中還含有豐富的間充質(zhì)干細(xì)胞。臍帶血中的干細(xì)胞含量豐富,明顯超過外周血含量,相當(dāng)或超過骨髓中的含量,其間充質(zhì)干細(xì)胞因其可以在體外誘導(dǎo)分化為多種組織細(xì)胞,以再生和修復(fù)病變或損傷的組織細(xì)胞,因此目前的應(yīng)用比較廣泛。
公司正在出售的產(chǎn)品:
PIHELISAKit
鴿子胃泌素(Gastrin)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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鉀離子通道蛋白7抗體
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細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白3抗體
CDKN3
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小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠叉頭框蛋白M1(FOXM1)elisa檢測(cè)試劑盒
環(huán)指蛋白32抗體
RNF32
上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體
KLF1, 2, 4
染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白2抗體 Anti-SMC2
蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基5C/PP2A-B56-γ抗體 Anti-PPP2R5C
原鈣粘蛋白γB4抗體 Anti-PCDHGB4
泛素蛋白連接酶G2抗體 Anti-Ube2G2/UBC7
膠體金標(biāo)記的兔抗豚鼠IgM
兔臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞通用型鼠菌Salmonella typhimurium基因檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞樣品氧化酶活性測(cè)定試劑盒
BFPP; DKFZp781L1398; EGF TM7 like; G protein coupled receptor 56; GPR 56 ; Polymicrogyria bilateral frontoparietal; TM7LN4; TM7XN1; TM7XN1 protein; GPR56_HUMAN.
兔臍帶血間充質(zhì)干細(xì)胞
大鼠脂肪干細(xì)胞
bEnd.3 [BEND3](小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株)
Spc-a-1(肺腺癌細(xì)胞)
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。