
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
兔外根鞘細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
皮膚組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
鋪路石狀細胞
分類
兔原代細胞
貨號
A01X2153
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常皮膚組織。
2)細胞鑒定:細胞角蛋白-19((CK-19)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 上皮 細 胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
毛囊的上皮是由表皮延伸而來,主要分為外根鞘和內(nèi)根鞘。其中,外根鞘相當(dāng)于表皮的基底層和棘細胞層,由數(shù)層不含色素的細胞組成。外根鞘細胞與表皮細胞相比具有更強的增殖活性。此外,有研究表明,胰島素與 EGF對外根鞘細胞的增殖具有明顯的促進作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠孤腓肽(OFQ/N)elisa分析檢測試劑盒
角質(zhì)細胞生長因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體
KRG2/DDX11
趨化素樣因子超家族成員2抗體
Cmtm2b
石蠟切片淀粉樣蛋白(AMYLOID)染色試劑盒
人β抑制蛋白2(ARRB2)elisa檢測試劑盒免費代測
大鼠白三烯D4(LTD4)elisa分析檢測試劑盒
小鼠細胞色素C(Cyt-C)elisa檢測試劑盒
腦瘤相關(guān)基因抗體
Netrin G2 Ligand
生長分化因子7抗體
GDF7
轉(zhuǎn)錄因子Tbx18抗體 Anti-TBX18
重組蛋白G抗體 Anti-Protein G
氧化固醇結(jié)合蛋白8抗體 Anti-ORP8
基質(zhì)交感分子1抗體 Anti-STIM1
磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體
phospho-ASK1 (Ser83)
嗅覺感受器蛋白10R2抗體
OR10R2
鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 Anti-VAV1
心臟特異性源盒轉(zhuǎn)錄因子NKX2.5抗體 Anti-Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1
Rho家族GTP酶2抗體 Anti-RND2/Rho7
轉(zhuǎn)錄共激活因子TAZ抗體 Anti-TAZ
大鼠白介素6(IL-6)elisa分析檢測試劑盒
兔外根鞘細胞D-乳酸待測樣品處理試劑盒
豬前列腺素E2(PGE2)elisa檢測試劑盒
Acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32 family member A; Acidic nuclear phosphoprotein 32 family member A; C15orf1; Acidic nuclear phosphoprotein pp32; AN32A_HUMAN; ANP32A; I1PP2A; Inhibitor 1 of protein phosphatase 2A; Lanp; Leucine Rich Acidic Nuclear Protein; Leucine-rich acidic nuclear protein; MAPM; Mapmodulin; PHAPI; Potent heat stable protein phosphatase 2A inhibitor I1PP2A; Potent heat-stable protein phosphatase 2A inhibitor I1PP2A; PP32; Putative HLA DR associated protein I; Putative HLA-DR-associated protein I; Putative Human HLA Class II Associated Protein; Putative human HLA class II associated protein I.
兔外根鞘細胞
大鼠胸腺成纖維細胞
小鼠乳腺癌細胞帶綠色熒光;4T1/GFP (種屬鑒定)
T47D人乳腺導(dǎo)管癌細胞
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。