
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產品名稱
小鼠膈肌細胞
產品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
膈肌組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭狀細胞
分類
小鼠原代細胞
貨號
A01X1913
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)細胞來源于實驗動物正常膈肌組織。
2)細胞鑒定:肌動蛋白(α-actin)熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭狀細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf原代骨骼肌細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
膈肌是位于胸腔與腹腔之間的肌肉纖維組織,其周圍為肌腹,中央為腱膜,是機體重要的呼吸肌。
組織學上,膈肌屬骨骼肌,成熟的骨骼肌纖維不具有增殖能力。骨骼肌衛(wèi)星細胞是骨骼肌與肌膜之間的一種體積較小的細胞,排列在肌纖維的表面,當肌纖維損傷后,可分化為肌纖維修復損傷。隨著組織發(fā)育的成熟,肌衛(wèi)星細胞數量相對減少。
公司正在出售的產品:
豚鼠白介素4(IL-4)elisa分析檢測試劑盒
人SAA/LDL復合物 elisa分析檢測試劑盒
細胞CASEIN KINASE 2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
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嗅覺受體家族5亞基3抗體 OR5P3
血型Lewis A抗原抗體 Blood Group Lewis a
蛋白磷酸酶樣A結構域蛋白1抗體 PTPLAD1
電導鈣激活鉀通道蛋白1抗體 KCNN1
F-box蛋白9抗體 FBXO9
FITC標記人CD68單克隆抗體 human CD68/FITC
磷酸化組蛋白去乙?;?span>7抗體 phospho-HDAC7 (Ser358)
卵母細胞表達蛋白OOEP抗體 OOEP
21號染色體開放閱讀框87抗體 C21orf87
5號染色體開放閱讀框42抗體 C5ORF42
肌微管素相關蛋白9抗體 MTMR9
脊髓小腦失調癥蛋白1抗體 ATXN1
P物質受體抗體 Neurokinin 1 Receptor
RAS相關蛋白Rab5B單克隆抗體 RAB5B
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶SRPK7抗體 SRSF7
通用轉錄因子ⅡA亞基1/TFIIA-α抗體 GTF2A1 alpha
大鼠FK506結合蛋白12-雷帕霉素相關蛋白1(FRAP1)elisa分析檢測試劑盒
小鼠膈肌細胞Ub ELISA Kit
山羊谷胱甘肽還原酶(GSR)elisa分析檢測試劑盒
p18; SUMO 1 protein ligase; SUMO conjugating enzyme UBC9; SUMO-1 conjugating enzyme; SUMO-1-protein ligase; SUMO-conjugating enzyme UBC9; SUMO-protein ligase; UBC9; UBC9_HUMAN; UBCE9; Ube2i; Ubiquitin carrier protein 9; Ubiquitin carrier protein; Ubiquitin carrier protein I; Ubiquitin conjugating enzyme 9; Ubiquitin conjugating enzyme UbcE2A; Ubiquitin like protein SUMO 1 conjugating enzyme; Ubiquitin protein ligase E2I; Ubiquitin-conjugating enzyme E2 I; Ubiquitin-protein ligase I.
小鼠膈肌細胞
大鼠腎間質成纖維細胞
BICR 10人頭頸部鱗狀細胞癌細胞
鼻咽癌細胞株;6-10b (STR)
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。