培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開始生長(zhǎng)。如果無污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠鼓膜上皮干細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
鼓膜組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
鋪路石狀細(xì)胞
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1984
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常鼓膜組織。
2)細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白(PCK)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：鋪路石狀細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf 原代 角質(zhì)形成 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
鼓膜也稱耳膜，為一彈性灰白色半透明薄膜，將外耳道與中耳隔開。鼓膜穿孔不能，可能與干細(xì)胞受損或增殖抑制有關(guān)。鼓膜上皮干細(xì)胞的分布與鼓膜的血供豐富的區(qū)域一致。
鼓膜上皮干細(xì)胞高表達(dá) β1整合素，有很強(qiáng)的黏附型，對(duì)Ⅳ型膠原的黏附鼻其他細(xì)胞更快、更強(qiáng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
HMGB-1ELISAKit
倉鼠白介素3(IL-3)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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人電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白-泛醌氧化還原酶/電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃素蛋白脫氫酶(ETFDH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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植物1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RuBisCO)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
支架蛋白IQGAP2抗體
IQGAP2
自噬相關(guān)蛋白10抗體
Apg10
細(xì)胞N-鏈接硫酸酯化糖胺多糖（N-sGAG）含量二甲基亞甲基藍(lán)（DMMB）比色法定量檢測(cè)試劑盒
小鼠白介素4(IL-4)elisa檢測(cè)試劑盒
單胺氧化酶測(cè)試盒
CYP1A2蛋白共沉淀分析試劑盒
RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體
RAB40A
表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白2抗體
CELSR2
葡萄糖神經(jīng)酰胺合成酶抗體 Anti-UGCG/Ceramide glucosyltransferase
泛酸激酶2抗體 Anti-PANK2
Ⅱ型膠原α1 N端前體肽抗體 Anti-procollagen type IIA
精神障礙相關(guān)GAP蛋白抗體 Anti-srGAP3
APC標(biāo)記的羊抗兔IgG H&L
小鼠鼓膜上皮干細(xì)胞小鼠16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠晚期糖基化端產(chǎn)物特異受體(AGER)elisa檢測(cè)試劑盒
SNX 1a; Snx1; Snx1; SNX1_HUMAN; SNX1a; Sorting nexin 1; sorting nexin 1A; Sorting nexin-1; Vps5.
小鼠鼓膜上皮干細(xì)胞
大鼠腮腺細(xì)胞
CAL 51人乳腺癌細(xì)胞
大鼠骨髓瘤細(xì)胞；IR983F
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。