
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠口腔黏膜上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
口腔黏膜組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
上皮樣
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1982
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實驗動物的口腔黏膜組織。
2)細(xì)胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 delf 原代 上皮 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
口腔上皮細(xì)胞是一種上皮細(xì)胞。人的口腔上皮細(xì)胞是扁平、多邊形的,形狀不很規(guī)則。 口腔各壁都有黏膜覆蓋??谇簧掀ぜ?xì)胞主要分布在口腔兩側(cè)頰部。
上皮的垂直切面上,細(xì)胞形狀不一。緊靠基膜的一層基底細(xì)胞為矮柱狀,為具有增殖分化能力的干細(xì)胞,部分子細(xì)胞向淺層移動?;讓右陨鲜菙?shù)層多邊形細(xì)胞,再上為幾層梭形或扁平細(xì)胞。僅靠近表面幾層細(xì)胞為扁平狀,基底層細(xì)胞能不斷分裂增生,以補(bǔ)充表層衰老或損傷脫落的細(xì)胞。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的,有利于復(fù)層扁平上皮的營養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品:
鴨β干擾素(IFN-β/IFNB)elisa檢測試劑盒
A型鉀離子通道調(diào)節(jié)蛋白4抗體
KCNIP4
細(xì)胞分裂周期37樣蛋白1抗體
CDC37L1
細(xì)胞S6 KINASE激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)elisa檢測試劑盒
大鼠肌球蛋白(MYS)elisa檢測試劑盒
豬白介素1(IL-1)elisa分析檢測試劑盒
結(jié)核分枝桿菌抗體
Mycobacterium tuberculosis Ag85B
乳腺腫瘤病毒受體源蛋白抗體
FAM89B
跨膜蛋白59抗體 Anti-TMEM59
Rho GTP酶激活蛋白1/血管畸形骨肥大綜合征相關(guān)蛋白抗體 Anti-RASA1
神經(jīng)細(xì)胞分化因子1抗體 Anti-NeuroD1/NEUROD
臂板蛋白3F抗體 Anti-Sema3F/semaphorin 3F
2,4-二氯苯氧乙酸(除草劑)單克隆抗體
2,4-D(24D1)
核轉(zhuǎn)錄因子NFXL1抗體
NFXL1
血清學(xué)定義結(jié)腸抗原1抗體 Anti-SDCG1
神經(jīng)元特異性烯醇化酶/γ 烯醇化酶抗體 Anti-NSE
維甲酸相關(guān)孤兒受體γ抗體 Anti-RORG/ROR gamma
跨膜蛋白4超家族成員3抗體 Anti-TM4SF3
大鼠低密度脂蛋白復(fù)合物(LDL-IC)elisa分析檢測試劑盒
小鼠口腔黏膜上皮細(xì)胞酵母β-內(nèi)酰胺酶報告基因活性熒光定量檢測試劑盒
小鼠丙二酸單酰輔酶A(malonyl CoA) elisa檢測試劑盒
CAD18_HUMAN; Cadherin 14; Cadherin14; Cadherin 18; Cadherin18; Cadherin 18, type 2; Cadherin-14; Cadherin-18; CDH14; CDH14L; CDH18; CDH24; EY CADHERIN.
小鼠口腔黏膜上皮細(xì)胞
大鼠脾基質(zhì)細(xì)胞
F-36P人白血病細(xì)胞
其它
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。