細(xì)胞簡(jiǎn)介：
膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官。它是一個(gè)囊形結(jié)構(gòu)，位于骨盆內(nèi)，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌，可以控制尿液的排出。膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞作為膀胱上皮細(xì)胞的支持細(xì)胞，起著十分重要的作用。
體外培養(yǎng)膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞不僅為組織工程膀胱，尿道提供種植細(xì)胞的必要手段，也是研究膀胱纖維化的基礎(chǔ)與前提。
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組織來(lái)源 |
產(chǎn)品規(guī)格 |
貨號(hào) |
用途 |
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膀胱組織 |
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
A01X1841 |
僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常膀胱組織。
2)細(xì)胞鑒定：波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形細(xì)胞，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代 成纖維 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)具體步驟：
（1）動(dòng)物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡(jiǎn)單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無(wú)菌操作臺(tái)使用無(wú)菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來(lái)，同時(shí)能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過(guò)的心臟破碎組織塊經(jīng)過(guò)離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個(gè)無(wú)菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時(shí)，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過(guò)夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過(guò)夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個(gè)細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個(gè)細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進(jìn)行傳代，此時(shí)可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時(shí)間根據(jù)正常細(xì)胞消化時(shí)間即可，當(dāng)然可以在消化過(guò)程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達(dá)到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個(gè)細(xì)胞時(shí)候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來(lái)，大概率是不會(huì)再貼壁成功啦。根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時(shí)候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。實(shí)驗(yàn)方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來(lái)自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機(jī)械分散法的特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
大鼠腎損傷分子-1（Kim-1）elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠不對(duì)稱二甲基精氨酸(ADMA)elisa檢測(cè)試劑盒
小鼠殺傷細(xì)胞凝集素樣受體亞家族B, 成員1C(Klrb1c/Ly55c/Nkrp1c)elisa分析檢測(cè)試劑盒
人I 型膠原蛋白(COL I)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
組織PAK4激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）
鴿子脂聯(lián)素(ADP)elisa檢測(cè)試劑盒
人體BRCA－2 RFLP基因分析試劑盒
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大鼠CD320分子(CD320)elisa檢測(cè)試劑盒
鋅指蛋白780B抗體 ZNF780B
信號(hào)通路WNT8A抗體 Wnt8A
遲鈍蛋白家族2抗體 DOPEY2
單鏈DNA結(jié)合蛋白相互作用蛋白1 SOSSC
EID2蛋白抗體 EID2
FAM123A蛋白抗體 FAM123A
磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1重組兔單克隆抗體 Phospho-PLK1 (Thr210)
磷酸化形態(tài)發(fā)生紊亂關(guān)聯(lián)激活因子1抗體 phospho-DAAM1 (Thr361)
組織相容性抗原DRB4抗體 HLA-DRB4
1號(hào)染色體開放閱讀框124抗體 C1orf124
環(huán)氧合酶2重組兔單克隆抗體 Cyclooxygenase 2
活性氧物種調(diào)節(jié)因子1抗體 ROMO1
PerCP-Cy5.5標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 SOX9, PerCP-Cy5.5 conjugated
PE標(biāo)記人IL-2單克隆抗體 human IL-2/PE
生長(zhǎng)分化因子1抗體 GDF1
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK4抗體 MARK4
定量檢測(cè)試劑盒
小鼠膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)試劑盒
大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMA IgA)elisa檢測(cè)試劑盒
HCV-NS3; Serine protease NS3; Hepacivirin; NS3P; POLG_HCVBK; HCV NS3 transactivated protein; Hepatitis C Virus NS3; non structural polyprotein NS3; NS3; NS3P; Serine protease/NTPase/helicase. helicase NS3; NS3P; p70; NTPase; Serine protease.
小鼠膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞
大鼠腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞
HLC-1人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
人肝癌細(xì)胞；HepAD38