培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
脾臟組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
不規(guī)則細(xì)胞
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號
A01X1935
用途
僅供科研實驗
細(xì)胞特性：
1）組織來源于實驗動物小鼠的正常脾臟組織。
2)細(xì)胞鑒定：CD31或CD34熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代 內(nèi)皮祖 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介：
脾是重要的器官，有造血、濾血、衰老血細(xì)胞及參與反應(yīng)等功能。也是細(xì)胞遷移和接受抗原刺激后發(fā)生應(yīng)到、產(chǎn)生效應(yīng)分子的重要場所。
內(nèi)皮祖細(xì)胞具有游走特性，能進(jìn)一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細(xì)胞，缺乏成熟內(nèi)皮細(xì)胞的特征性表型，不能形成管腔樣結(jié)構(gòu)。其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
SPELISAKit
大鼠肥大細(xì)胞類胰蛋白酶(MCT)elisa分析檢測試劑盒
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大鼠黃嘌呤氧化酶(XOD)elisa檢測試劑盒
植物原花青素測試盒 50T/24樣 比色法
肌微管素相關(guān)蛋白4抗體
MTMR4
22號染色體開放閱讀框28抗體
C22orf28
轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體 Anti-TCEB3/Elongin A
ATP依賴解旋酶RENT1抗體 Anti-RENT1/hUPF1
NK細(xì)胞受體2A抗體 Anti-NKG2A
突觸融合蛋白1抗體 Anti-Syntaxin 1A(brain)
Cy5標(biāo)記的兔抗人IgM
小鼠脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞大鼠腎上腺素能受體α2C(ADRα2C)elisa檢測試劑盒
線蟲基因組DNA分離試劑盒
CNKR 2; CNK2; CNKSR2; Connector enhancer of kinase suppressor of Ras 2; Connector enhancer of KSR2; KIAA0902; KSR2; RP11 450P7.2; CNKR2_HUMAN.
小鼠脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞
大鼠脈絡(luò)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞
HSC-4人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞
人骨肉瘤細(xì)胞帶熒光素酶； 143B/LUC (STR)
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。