
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
小鼠輸卵管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
輸卵管組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
鋪路石狀細(xì)胞
分類
小鼠原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X1872
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常輸卵管組織。
2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞角蛋白-18(CK-18)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式:鋪路石狀細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代 上皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為該細(xì)胞的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡介:
輸卵管是卵子運(yùn)輸、儲(chǔ)存、獲能,以及卵母細(xì)胞采取、運(yùn)送、成熟、受精和早期胚胎發(fā)育的重要場(chǎng)所。輸卵管上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)可以用于飼養(yǎng)層細(xì)胞,與胚胎共培養(yǎng),克服胚胎的發(fā)育阻滯現(xiàn)象。
因此,體外培養(yǎng)輸卵管上皮細(xì)胞,不但可以進(jìn)一步了解影響生殖微環(huán)境變化的因素,而且還可以建立輸卵管上皮細(xì)胞與胚胎共培養(yǎng)體系,研究輸卵管上皮細(xì)胞對(duì)胚胎體外發(fā)育的影響。
公司正在出售的產(chǎn)品:
Mouseβ-defensins3ELISAKit
魚(鮭魚)瘦素(LEP)elisa分析檢測(cè)試劑盒
LEP ELISA kit
人吡哆醛/吡哆醇維生素B6激酶(PDXK)elisa分析檢測(cè)試劑盒
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小鼠I型膠原蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
乳制品L-乳酸比色法定量檢測(cè)試劑盒
豬內(nèi)皮素1(ET-1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)elisa檢測(cè)試劑盒
樁蛋白抗體
Leupaxin
羧肽酶X(M14家族2)抗體
CPXM2
膽固醇?;D(zhuǎn)移酶2抗體 Anti-SOAT2/ACAT2
環(huán)指蛋白156抗體 Anti-RNF156
核因子1X抗體 Anti-NFIX
鋅指蛋白693抗體 Anti-ZNF693/CASZ1
尿素轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白A2抗體
SLC14A2
溶血磷脂酶樣蛋白1抗體
LYPLAL1
胞吐分泌蛋白Sec8抗體 Anti-Sec8
蛋白激酶受體相關(guān)1β抗體 Anti-PKA regulatory subunit I beta
關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因抗體 Anti-PADI4
酶相關(guān)蛋白2抗體 Anti-TRP2
兔抗豬IgG H&L抗血清
小鼠輸卵管上皮細(xì)胞Bovine IgM / Cy3
G蛋白偶聯(lián)受體GPR125蛋白抗體
CD2-associated protein; Adapter protein CMS; AL024079; Cas ligand with multiple SH3 domains; C78928; Cd2ap; CMS; Mesenchyme to epithelium transition protein with SH3 domains 1; METS 1; Mets1; CD2AP_HUMAN.
小鼠輸卵管上皮細(xì)胞
大鼠結(jié)腸神經(jīng)元細(xì)胞
KMS-27人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞
人巨細(xì)胞白血病細(xì)胞株;Mo7e (STR)
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。