
培養(yǎng)方法與步驟:
①動(dòng)物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時(shí)間不能過長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進(jìn)行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí),待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁,并開始生長(zhǎng)。如果無污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞,這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
羊附睪上皮細(xì)胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
組織來源
附睪組織
生長(zhǎng)特性
貼壁培養(yǎng)
細(xì)胞形態(tài)
鋪路石樣 多角形細(xì)胞
分類
羊原代細(xì)胞
貨號(hào)
A01X2300
用途
僅供科研實(shí)驗(yàn)
細(xì)胞特性:
1)組織來源于動(dòng)物的正常附睪組織。
2)細(xì)胞鑒定:PCK熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:鋪路石樣,多角形細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 上皮 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
附睪是一個(gè)多數(shù)曲折、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官,一面連接著輸精管,一面連接著睪丸的曲細(xì)精管。當(dāng)精子離開睪丸時(shí),就跑到附睪里,繼續(xù)生長(zhǎng)成熟。附睪管除貯存精子外還能分泌附睪液,其中含有某些、酶和特異的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),它們有助于精子的成熟。
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠松弛素relaxin,RLNelisa檢測(cè)試劑盒
A型H1N1流感病毒神經(jīng)氨酸酶抗體
Influenza A H1N1 Neuraminidase
錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白20A3抗體
ANKRD20A3
人半乳糖(Galactose)elisa檢測(cè)試劑盒
食物葡萄糖氧化酶比色法定量檢測(cè)試劑盒
豬可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)elisa檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)
大鼠血管**素4(ANGPT4)elisa檢測(cè)試劑盒
MOSC2蛋白抗體
MOSC2
1號(hào)染色體開放閱讀框94抗體
C1orf94
跨膜蛋白18抗體 Anti-Tmem18
視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤結(jié)合蛋白6抗體 Anti-RBBP6
富含亮氨酸重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體 Anti-NLRP9
癌基因VAV2抗體 Anti-VAV2
骨骼肌肌特異性肌鈣蛋白T-SS抗體
Troponin T-Slow Skeletal
ATP依賴RNA解旋酶DDX46抗體
DDX46
核糖核蛋白抗原抗體 Anti-SSA/RO52
抑瘤素M抗體 Anti-OSM/Oncostatin M
磷酸化P63腫瘤抑制基因抗體 Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162)
跨膜蛋白147抗體 Anti-TMEM147
大鼠谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
羊附睪上皮細(xì)胞人HIV-1 TAT互動(dòng)蛋白2(HTATIP2/TIP30)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠Toll樣受體9(TLR9)elisa檢測(cè)試劑盒
Protein phosphates-1; PP-1 gamma, beta, alpha, catalytic subunit; MGC3672; PP 1B; PP-1B; PPP1CB; PP1B; PPP1CD; PP1beta; Protein phosphatase 1 beta; Protein phosphatase 1 catalytic subunit beta isoform; Protein phosphatase 1 delta; Serine threonine protein phosphatase PP1 beta catalytic subunit; Serine/threonine-protein phosphatase PP1-beta catalytic subunit; PP1B_HUMAN; Protein phosphatase 1, catalytic subunit, beta isozyme; Protein phosphatase 1, catalytic subunit, delta isoform;
羊附睪上皮細(xì)胞
大鼠股動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
MES-SA人癌細(xì)胞
人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞;ACC-2 (STR)
原代細(xì)胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。