
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱
羊主動脈平滑肌細胞
產(chǎn)品規(guī)格
5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
組織來源
主動脈組織
生長特性
貼壁培養(yǎng)
細胞形態(tài)
長梭形、不規(guī)則細胞
分類
羊原代細胞
貨號
A01X2294
用途
僅供科研實驗
細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常主動脈組織。
2)細胞鑒定:平滑肌肌動蛋白(α-SMA)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:長梭形、不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF 原代 平滑肌 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細胞簡介:
血管發(fā)生和發(fā)展的一個主要因素是由于血管平滑肌細胞( smooth muscle cells, SMCs)轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細胞能表達鈣離子通道,ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表達可能是造成血管壁炎癥反應,并進一步造成血管的原因 。因此,對血管平滑肌細胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管的靶向方法。
公司正在出售的產(chǎn)品:
雞HSP60抗體(IgM)elisa分析檢測試劑盒
大鼠清淀粉樣蛋白P(SAP)elisa檢測試劑盒
轉(zhuǎn)氫酶-2試劑盒
人血管緊張素II-1型受體(AT1R)elisa檢測試劑盒
稻米類植酸比色法定量檢測試劑盒
緊密連接蛋白2抗體 Anti-TJP2
視網(wǎng)膜色素上皮細胞特異性蛋白65抗體 Anti-RPE65
核受體輔助抑制因子1抗體 Anti-NCoR1
玻璃粘連蛋白抗體 Anti-VTN/Vitronectin
腦啡肽A抗體 PENK(237-258)
鳥苷酸環(huán)化酶激活因子2B抗體 GUCA2B
FITM1蛋白抗體 FITM1
GDAP1L1蛋白抗體 GDAP1L1
氧固醇結(jié)合蛋白樣6抗體 OSBPL6
乙醇脫氫酶5抗體 ADH5
動力蛋白激活蛋白1抗體 DCTN1/DAP-150
耳聾常染色體顯性遺傳相關(guān)蛋白3抗體 DIAPH3
源盒轉(zhuǎn)錄因子8抗體 HOXD8
拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體 Topoisomerase I
RNA結(jié)合蛋白28抗體 RBM28
SCAPER蛋白抗體 SCAPER
6號染色體開放閱讀框70抗體 C6orf70
ABL2蛋白抗體 ABL2
甲狀旁腺功能亢進蛋白2/細胞分裂周期73抗體 HRPT2
角蛋白相關(guān)蛋白KAP22.1抗體 KAP22.1
植物磷脂酶D(Phospholipase D)總活性熒光定量檢測試劑盒
羊主動脈平滑肌細胞Rabbit Anti-Monkey IgG H&L / APC
FAM101A蛋白抗體
N-Methyl-d-Asprtate receptor epsilon 1; Glutamate Receptor Ionotropic N Methyl D Aspartate epsilon-1; N Methly D Aspartate Receptor Channel Subunit Epsilon 1; NMDZ1_HUMAN.
羊主動脈平滑肌細胞
大鼠肝星狀細胞
MRK-nu-1人乳腺癌細胞
人眼脈絡(luò)黑色瘤細胞; c918 (STR)
原代細胞步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。