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HRP底物氨乙基咔唑操作步驟

日期:2024-10-23 00:28
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摘要: 氨乙基咔唑(AEC)產(chǎn)生紅色產(chǎn)物,其敏感性低于DAB,但可用于DAB反應(yīng)產(chǎn)生較高背景或要求改變產(chǎn)物顏色的實驗。此產(chǎn)物可溶于醇,但不溶于水。 1、需要的溶液和特殊設(shè)備 0.4% AEC用 N,N—二甲基甲酰胺(DMF)溶解, 0.1 mol/L乙酸鈉緩沖液(pH5.2),過氧化氫, Gelvatol或Mowiol,光學(xué)顯微鏡(通常帶有照相機以便于記錄結(jié)果)。 2、 操作步驟 (1) 用 l mL DMF溶解 4 mg AEC。AEC在DMF中穩(wěn)定,因此,可以用100 mL DMF溶解0.4 g AEC作為貯存液備用; (2) 加 l mL AEC溶液至15 mL 0.1 mol/L的乙酸鈉緩沖液...

氨乙基咔唑(AEC)產(chǎn)生紅色產(chǎn)物,其敏感性低于DAB,但可用于DAB反應(yīng)產(chǎn)生較高背景或要求改變產(chǎn)物顏色的實驗。此產(chǎn)物可溶于醇,但不溶于水。

1、需要的溶液和特殊設(shè)備

0.4% AEC用 N,N—二甲基甲酰胺(DMF)溶解, 0.1 mol/L乙酸鈉緩沖液(pH5.2),過氧化氫, Gelvatol或Mowiol,光學(xué)顯微鏡(通常帶有照相機以便于記錄結(jié)果)。

2、 操作步驟

(1) 用 l mL DMF溶解 4 mg AEC。AEC在DMF中穩(wěn)定,因此,可以用100 mL DMF溶解0.4 g AEC作為貯存液備用;

(2) 加 l mL AEC溶液至15 mL 0.1 mol/L的乙酸鈉緩沖液(pH5.2)中,并攪拌;

(3) 加0.15 mL 3%過氧化氫于水中。過氧化氫一般是30%的溶液提供,在4℃可存放1個月;

(4) 用濾紙過濾;

(5) 加此溶液到標(biāo)本中,并于室溫孵育10~40 min,水洗終止反應(yīng);

(6) 優(yōu)化:如果需要復(fù)染,只可用水溶性染料;

(7) 用Gelvatol或Mowiol封片。

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